贻贝蛋白酶解体系稳定性影响因素及其机制
粒度,粒子,1材料与主要仪器,1材料与试剂,2仪器设备,2试验方法,1贻贝酶解液的制备,2贻贝酶解液水解度的测定,3蛋白质沉淀率测定,4其它分析与检测方法,5统计分析方法,3结果与分析,1酶种类对稳定性的影响,2蛋白浓度
毛凤娇 易俊洁 乔美玲 王震宇 秦 磊 杜 明(1 大连工业大学食品学院 国家海洋食品工程技术研究中心 辽宁大连116034 2 昆明理工大学农业与食品学院 云南昆明650500)
贻贝在我国北方俗称“海红”,其干制品名为“淡菜”,自然分布于黄海、潮海沿岸,人工南移后,东海和南海也可养殖、生产,年产量达85 万t[1-2],其中大连的产量居全国之首[3-4]。贻贝含有大量人体必需的无机微量元素,且含有多种对人体有益的营养物质,味道鲜美,营养丰富,含有40%~50%的蛋白质,20%~30%的碳水化合物,10%~12%的脂肪[5-6],被人们誉为“海中鸡蛋”。
贻贝作为一种重要的海洋经济贝类,含有多种不饱和脂肪酸[7]、矿物质元素[8]、生物活性肽[9-10]等多种功能性物质,具有很高的营养价值[11]。随着对贻贝加工利用研究的深入,开发具有生理活性的贻贝深加工产品,具有巨大的发展前景[12]。目前,活性多肽的氨基酸组成及序列直接相关[13]。采用酶解法将贻贝蛋白分子中功能性肽段释放出来,进而将其开发成不同功能活性的多肽产品,相关研究引起广泛关注[14]。然而,由于HMP 体系中同时存在蛋白质、多肽、氨基酸等多种物质,体系组成较为复杂,该体系较为不稳定,这严重限制了其在饮料工业的应用[15]。本研究从上述问题出发,重点研究蛋白浓度和pH 值等因素对贻贝蛋白酶解体系颗粒分布及稳定性的影响,确定有利于体系稳定的最适条件,同时研究粒度分布与宏观稳定性的关系,旨在为贻贝蛋白的深度开发奠定理论基础。
1 材料与主要仪器
1.1 材料与试剂
1.1.1 原料 新鲜贻贝,产地大连,选择个体大小均匀的为宜。
1.1.2 试剂 中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、福林酚试剂、考马斯亮蓝等生化试剂,索莱宝生物科技有限公司(北京);其它化学试剂均为分析纯,国药试剂有限公司(上海)。
1.2 仪器设备
Zetasize 3000 HSA 激光粒度分析仪,英国MALVERA 仪器公司;4000 Q-TRAP 液相色谱质谱联用仪,德国Thermo 公司;MF-ChemiBIS 2.0凝胶成像系统,以色列DNR 公司;UDK129 凯氏定氮仪,意大利VELP;AE-8135 垂直电泳,日本ATTO公司;CR22离心机,Hitachi/日立;pH 计Sartorius,科学仪器有限公司。
2 试验方法
2.1 贻贝酶解液的制备 ......
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