刘 洋 黄 菲 李巍巍 唐小俊 张瑞芬 张名位*

    (1 华中农业大学食品科技学院 武汉 430070 2 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 农业农村部功能食品重点实验室广东省农产品加工重点实验室 广州510610)

    荔枝(Litchi chinensis Sonn)是无患子科(Sapindacceae)荔枝属的常绿乔木，为我国华南地区的特色水果。其果肉味甜、多汁，富含多糖、酚类、膳食纤维等多种营养物质，具有较高药用价值[1]。据中医记载，荔枝果肉能够治疗或改善血气不足、失眠健忘、贫血、脾虚等症状[2]。现代研究发现，荔枝多糖是荔枝果肉的主要活性成分之一，具有抗氧化[3-6]，免疫调节[7-8]，降血糖[9-10]等作用。

    基于荔枝免疫调节活性的机制研究及满足其精深加工的需要，多糖提取分离技术的改进至关重要。传统的植物多糖提取方法主要是热水浸提法[11-12]，虽然操作简单，使用仪器少，但是存在耗时长，提取率低等不足之处。随着现代分离技术的不断发展，植物多糖的提取也获得了较大突破。目前关于荔枝果肉多糖的提取仍多以热水浸提法为主。除此之外，董周永等[13]研究了家庭式微波炉对荔枝果肉多糖提取率的影响；陈卫云[14]和彭刚[15]分别探究了超声微波酶解协同技术对荔枝果肉多糖提取率及其清除自由基的影响。然而，针对超声-微波提取的荔枝多糖的体内免疫活性研究尚无报道。由于超声波的空化效应以及微波特有的热效应和机械效应，一方面，能够加速细胞壁组织破裂，促进多糖的溶出；另一方面，可能改变多糖的结构，从而引起其活性发生变化[16-17]。本研究采用响应面法优化超声-微波提取荔枝果肉多糖的提取工艺，并通过动物实验模型评价其体内的免疫调节作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料、试剂与仪器

    荔枝品种为“黑叶”，由广东省农业科学院果树研究所提供，2016年7月采摘于其实验园地。KM 小鼠和YAC-1 细胞由中山医学院实验动物研究中心提供。

    DMEM 培养基、胎牛血清、HBSS 缓冲溶液，美国Gibco 公司；甲基噻唑基四唑(MTT)、刀豆球蛋白A(ConA)、青链霉素，美国Sigma 公司；印度墨汁，德国Chroma-Gesellschaft 公司；其它试剂均为国产分析纯级。

    CW-2000 型超声-微波协同萃取仪，上海新拓微波溶样测试技术有限公司；EYELA N-1000旋转蒸发仪，日本东京理化器械；ZL-1 真空冷冻干燥机，上海医疗器械高等专科学校实验厂；FA-1104 电子天平 ......