刘煜珺 张雨晴 高 原，2 李唤宇 牟光庆 妥彦峰*

    (1 大连工业大学食品学院 辽宁大连116034 2 大连市益生菌功能特性研究重点实验室 辽宁大连116034)

    自由基是含有单独的没有配对电子的分子或分子碎片[1]。 当自由基夺取机体细胞大分子、电子时，会导致蛋白质、细胞、DNA、RNA 等结构受损。由于疾病、感染、辐射等不利环境造成机体本身防御体系不能发挥有效的清除活性氧作用， 或有外源性自由基入侵导致活性氧水平超出正常范围，便会出现活性氧损伤。

    在稳定的条件下机体会有特定的防御和清除系统，包括抗氧化酶系统和非抗氧化酶系统，抗氧化物酶可与由氧化应激引起的自由基发生反应，从而阻止细胞的损伤， 常见的防御抗氧化酶系包括：超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等[2-3]。

    一些乳酸菌胞外多糖(LAB EPS)具有清除自由基、抗氧化等重要的生理功能[4]。BJ Seo 等[7]发现植物乳杆菌YML009 胞外多糖中部分纯化的EPS(5～40mg/mL)具有清除DPPH 自由基的抗氧化功效，DPPH 自由基清除率达到44.73%，且清除率越大，抗氧化能力越强。Xin Wang 等[5]报道随着植物乳杆菌KX041(L. plantarum KX041)的EPS 作用浓度增加，对ABTS 自由基的清除率也随之增高。李景艳[6]通过DPPH 自由基、羟自由基、超氧阴离子清除能力从15 株乳酸菌中筛选出一株产高抗氧化活性胞外多糖的菌株植物乳杆菌LP6， 该菌株胞外多糖可以提高H2O2氧化损伤PC12 细胞的存活率。

    本试验中从8 株乳杆菌所产胞外多糖中筛选出具有较高抗氧化活性的胞外多糖， 评价其对ABAP 损伤的人结肠癌腺细胞系HT-29 细胞存活及抗氧化酶系表达的影响， 旨在探究乳杆菌胞外多糖抗氧化的机理。

    1 试验方法

    1.1 试验试剂

    RPMI-1640 培养液、青霉素和链霉素，美国Gibco 公司；水溶性维生素E(Trolox)、荧光素钠(Fluorescein sodium，FL)、2，2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(2，2′-Azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride，ABAP)、TPTZ(2，4，6-tripyridyl-striazine)、ABTS(2，2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))、邻二氮菲 ......