严羽萍 刘 丽 朱军莉* 陆海霞 励建荣

    (1浙江工商大学食品与生物工程学院 浙江省食品安全重点实验室 杭州 310018

    2渤海大学辽宁省食品安全重点实验室 辽宁锦州121013)

    养殖鱼类低温贮藏品质下降的主要原因是嗜冷腐败微生物的生长繁殖。在有氧冷藏条件下，假单胞菌多为淡水鱼的特定腐败菌。胥亚夫等[1]发现水产品中主要腐败菌为假单胞菌属细菌，包括荧光假单胞菌、腐臭假单胞菌和边缘假单胞菌。Parlapani等[2]报道海鲷中的腐败微生物为假单胞菌属，特别是荧光假单胞菌。杨宪时等[3]研究罗非鱼冷藏过程菌相的变化，发现在0～10℃冷藏过程中假单胞菌为优势腐败菌，荧光假单胞菌为最优势种群。郭全友等[4]对养殖大黄鱼的菌相研究中，鉴定出腐败希瓦氏菌和假单胞菌是低温贮藏大黄鱼的优势腐败菌。

    荧光假单胞菌是革兰氏阴性、有鞭毛，产生物被膜，是广泛存在于土壤和水生环境中的微生物，也是食品微生物腐败的重要嗜冷腐败菌[5]。研究表明，荧光假单胞菌分泌的蛋白酶和酯酶等代谢产物难以用瞬时高温灭活，导致冷藏食品的风味等物化性质变化。假单胞菌属还常在生产设备表面形成生物膜，对食品生产可能带来持续污染。在食品环境中，生物被膜成为假单胞菌的寄所，可以提高其对在食品加工过程中遇到的各种环境压力(低温、酸、盐、消毒剂)的抵抗力[6-7]。Anna Koza等[8]研究表明，假单胞菌属可以形成多种生物被膜，能在静止液体的气-液界面上定殖并成膜。

    目前荧光假单胞菌的致腐能力主要集中在牛奶分离株，而水产品来源的荧光假单胞菌仅报道其分离与鉴定，对腐败表型和生物被膜形成的报道较少。鉴于此，本研究分析5株荧光假单胞菌的生物被膜形成及致腐能力，为探究鱼源荧光假单胞菌致腐机理及生物被膜的控制提供理论基础，为水产品保鲜提供借鉴。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    PF01、PF06和PF07为冷藏大黄鱼中的优势腐败菌，PF10为大菱鲆的特定腐败菌，NCBI登录号分别为 KU173826、KU173831、KU173832、KR706375，PFuk4为标准菌株，购买于微生物菌种保藏中心。LB肉汤、胰酶大豆肉汤(TSB)、营养琼脂(NA)，泳动性培养基(胰蛋白胨1%，NaCl 0.5%，琼脂0.3%)，均购买于青岛海博生物有限公司；SYTO9，Thermofisher，Waltham，MA，USA；96 孔 细胞培养板，无锡 NEST生物技术有限公司。

    1.2 仪器与设备 ......