间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B1
包被,缓冲液,1材料与试验方法,1试剂,材料与仪器,2试验方法,2结果与讨论,1AFB1包被抗原的鉴定,2ic-ELISA方法工作条件的确定,3ic-ELISA检测方法的建立,4ic-ELISA检测方法的性能评
潘明飞 李诗洁 郭丹丹 王俊平 王 硕(教育部食品安全与营养重点实验室 天津科技大学 天津 300457)
黄曲霉毒素(Aflatoxin,AF)是一种典型的真菌毒素,是主要由黄曲霉和寄生曲霉菌产生的一类次生代谢产物[1-2]。根据其化学结构和毒性差异,主要分为 B1、G1、G2、M1、M25 种,均为二氢呋喃香豆素的衍生物[3]。AF广泛存在于黄曲霉污染的花生、玉米、大米等农作物产品及其制品中,其中粮食食品中主要以B1,G1,G2为主,牛乳及其制品中主要是M1、M2。AFB1的毒性最强,有相当强的致畸、致癌、致突变作用[4-5]。其毒性可达到氰化钾的10倍,砒霜的68倍,三聚氰胺的416倍。AFB1可通过诱导人类p53肿瘤抑制基因的249位密码子突变,从而引发肝癌等恶性疾病[6-7]。据报道,在亚非地区,肝癌发病率直接与被AFB1污染食物的消费情况成正比。1993年,国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer,IARC)正式将AFB1列为IA类致癌物质[8],认为其是一种毒性极强的物质。另外,AF属于天然毒素,其产生与环境因素密切相关。在作物种植、收获、储藏和加工过程中,很难避免和防止产毒真菌的危害,其含量也随着农作物生长、收获、加工、储运过程中菌体生长和污染程度加深而日趋上升[9-11]。国际上对食品和农产品产业链条的各环节中AF含量都进行严格监管。
迄今为止,许多国家和组织均对AF在食品中设定了最高残留限量(Maximum Residue Limits),如中国[12]和美国[13]针对玉米、花生仁、花生油中AFB1的 MRLs均为 20 μg/kg,欧盟[14]为 2 μg/kg。然而,近年来,有关AF引起对粮食、油料等食品的污染事件屡见不鲜,对食品质量和人类健康造成极大的威胁,给社会经济造成极大的损失。同时,各种基于不同原理的检测分析方法也逐渐被开发出来用于不同样品中AFB1的定性、定量分析。目前常用的AFB1检测方法主要有如薄层色谱法[15-16]、高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)[17-18]及液-质谱联用技术,如气-质谱联用(Gas Chromatograph-Mass Spectrometer,GC-MS)[19]、 液-质联用(Liquid Chromatograph-Mass Spectrometer,LC-MS)[20-21]等。仪器分析方法能够为食品中AFB1污染物提供准确度和灵敏度相对较高的分析 ......
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