李诗言 崔益玮 王 扬 戴志远 沈 清 *

    (1浙江工商大学海洋食品研究院 杭州 310012

    2浙江省水产质量检测中心 杭州 310023

    3浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室 杭州 310012)

    微囊藻毒素(Microcystins)为蓝藻水华释放的一类具有强烈致癌作用的肝毒素，其毒性较大，分布广泛，目前已发现异构体约80余种，其结构由7个氨基酸组成，主要产自微囊藻(Microcystis aeruginosa)、鱼腥藻(Anabaena)、念珠藻(Notoc)等浮游性蓝藻，化学结构如图1所示，其中MC-LR最为常见[1]。调查表明，我国60%的水体由于过多接纳了氮和磷等营养物质，使水体的生态结构与功能发生了重大变化，导致藻类的异常繁殖生长，从而出现蓝藻水华现象[2]。水面湖靛堆积，大量消耗水中溶解氧致鱼类窒息死亡，藻体死亡分解过程中释放生物毒素类次级代谢产物，导致水体污染，水生动植物死亡[3]。MC进入人体肝细胞后，能强烈地抑制蛋白磷酸酶(PP1、PP2A)的活性，诱发细胞角蛋白高度磷酸化，导致肝细胞微丝分解、破裂和出血[4]。

    食品中的微囊藻毒素的分析监测对于维护食品安全和人类健康具有重要意义。微囊藻毒素被列为有机污染毒素的监测项目，并有国家标准推荐的水体中微囊藻毒素的安全质量浓度为1 μg/L。目前主要化学分析法包括薄层色谱(TLC)[5]、气相色谱(GC)[6]、液相色谱(LC)[7]、毛细管电泳(CE)[8]等。其中高效液相色谱法(HPLC)是目前应用最多的方法，利用液相色谱的特点，与质谱或核磁共振联用确定其分子式和结构[9]。该方法分析速度快，灵敏度高，结构准确稳定。该方法只针对目标化合物，对于潜在的异构体无法检测。

    本试验针对微囊藻毒素化学结构中具有共同母核的结构特征，创新性地采用PreIS的扫描方式，建立DIA检测法，经质谱分析并优化相关参数，以提高离子化效率，降低杂质干扰。通过比较LC-MS/MS和DIA两种方法的线性、精密度、灵敏度、回收率、经济性等参数，建立稳定、高效的微囊藻毒素分析方法，用于快速分析水体及动植物中的残留，确定监测物种、采样站位和频率、警戒值和防控反应机制等，为相关部门完善和强化水产品监测和管理工作提供科学依据，从而保障食用安全和近岸养殖业的健康发展。

    1 试验部分

    1.1 主要仪器与装置

    1200高效液相色谱系统，美国Agilent公司；4000QTrap串联飞行时间质谱仪，美国Ab Sciex公司 ......