任娇艳 李宇娟 史传超 张 婷 李溢佳 袁尔东* 梁 明*

    (1 华南理工大学食品科学与工程学院 广州 510640

    2 无限极(中国)有限公司 广州 510665)

    土茯苓，是百合科光叶菝葜(Smilax glabra Roxb.)的干燥根茎，其黄酮类成分具有明显的抗炎、镇痛和抗疲劳效果。研究表明，土茯苓提取物对XOD具有明显的抑制作用，可降低尿酸的生成，是临床上用于替代别嘌呤醇治疗高尿酸血症和痛风的潜在药物[1]。土茯苓抑制XOD活性的物质基础是表儿茶素、落新妇苷、槲皮素及柚皮素等。目前国内外对天然产物抗痛风药的研究发现，黄酮类可通过促进尿酸排泄，抑制XOD活性等多途径多靶点防治高尿酸血症[2]。

    鲣鱼，属鲈形总目，鲣属，是一种海洋洄游鱼类，研究发现鲣鱼的胃蛋白水解物抗氧化活性高[3]。从鲣鱼中鉴定合成的多肽DLDLRKDLYAN具很强的ABTS自由基和单线态氧清除能力[4]。日本著名海洋生物科技公司YSK从鲣鱼肌肉中提取鹅肌肽和肌肽两种天然深海鱼低聚肽，发现其具有显著的降尿酸功效。鲣鱼小分子低聚肽与蛋白相比更容易被人体吸收利用[5]。报道发现，小分子肽与天然产物交互作用后，可提高其生物活性，如血清白蛋白可与某些药物分子通过相互作用将药物分子更有效地运输到靶器官[6-8]。因此，研究小分子多肽与中草药活性成分的交互作用具有重要的科学和实际应用意义。

    本试验以土茯苓和鲣鱼为原料，制备土茯苓黄酮和鲣鱼蛋白肽，比较水提土茯苓和醇提土茯苓中活性成分的含量、DPPH·清除活性及XOD抑制活性，并以蛋白质回收率、DPPH·清除活性和XOD抑制活性为指标筛选鲣鱼酶解的水解酶。在此基础上，探讨土茯苓黄酮与鲣鱼蛋白肽交互作用产物的XOD抑制活性、DPPH·清除活性及其稳定性。最后，利用荧光光谱法研究土茯苓黄酮与鲣鱼蛋白肽交互作用的猝灭机理。研究对中草药活性成分与小分子活性肽的相互作用机理及降尿酸复合产品的研发，具有理论和实践指导意义。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    土茯苓，广州南北行中药饮片有限公司；鲣鱼，山东。

    2，2-联苯基-1-苦基肼基(2，2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH)、黄嘌呤、黄嘌呤氧化酶、辣根过氧化物酶，美国Sigma公司；胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶，南宁庞博生物工程有限公司。

    1.2 主要仪器及设备

    UV754N紫外-可见光分光光度计，INESA上海仪电分析仪器有限公司；HYP-1020消化炉 ......