商迎辉 章丽娜 李梦洁 赵范范 刘馨君 魏 俊 黄汉昌 劳凤学

    (北京市生物活性物质与功能食品研究院 北京联合大学功能因子与脑科学研究院生物化学工程学院 北京 100191)

    生物素(Biotin)又称维生素 B7、维生素 H，是一种水溶性B族维生素，由含有一个硫原子的脲基环和一条戊酸的侧链组成，目前已知8种异构体。天然存在的D-生物素具有活性，为哺乳动物5种生物素依赖性羧化酶的辅酶，在催化糖原异生，氨基酸分解代谢和脂肪酸合成中起关键作用。生物素还通过共价键与组蛋白结合，在调节基因稳定性和表达中起重要作用[1]。

    生物素缺乏症(Biotin deficiency)以皮肤、黏膜和神经系统损害为主[2]。生物素主要来源于酵母、花椰菜、坚果类、蛋黄、肝脏和肾脏。人体肠道内细菌可合成一些生物素，一般情况下极少缺乏。然而，由于婴幼儿肠道功能较弱，需在婴幼儿食品中强化生物素，以避免生物素缺乏症的发生[3]。

    生物素测定方法有微生物法、同位素稀释法、比色测定法、荧光测定法、化学分光法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法、滴定分析法、动力学电位法、蛋白质耦合法、竞争耦合化学分光法、酶标记竞争耦合法、薄层层析法、毛细管电泳法、动物试验法、酶联免疫吸附法、微分脉冲伏安等。其中微生物法是最灵敏和应用最广泛的方法，是美国官方分析化学家协会(AOAC)推荐方法，也是美国、中国等国家的官方指定方法[3]。

    我国食品安全国家标准GB 5009.259-2016规定了食品中生物素的测定方法，然而该方法操作繁杂，微生物生长的不确定性强，影响因素较多。按照 CNAS-CL07：2011要求，本研究按照食品安全国家标准GB 5009.259-2016规定的方法对婴幼儿配方食品中生物素含量进行测定，依据JJF1059.1-2012和GB/Z22553-2010对测定过程中影响检验结果的各个分量进行评估，并给出扩展不确定度[4-7]。

    1 材料与方法[4]

    1.1 主要材料与试剂

    试样：生物素定值样品婴幼儿谷粉(婴幼儿配方食品)QC-RP-010中国检验检疫科学研究院测试评价中心。

    菌种：植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，中国科学院微生物研究所CGMCC 1.0485。标准品：生物素(标准品，纯度 99.6%，批号：100291-201303)，中国食品药品检定研究院。

    培养基及试剂：生物素测试肉汤(批号：5056924) ......