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编号:763158
离子色谱法测定母乳中的寡聚糖与游离唾液酸
http://www.100md.com 2019年11月13日 中国食品学报 2019年第10期
1材料与方法,1样品与试剂,2仪器与设备,3标准溶液,4离子色谱测定条件,5样品处理,6统计学分析,2结果与分析,1离子色谱法中梯度洗脱的选择,2标准曲线线性范围,3检出限与定量限,4精密度与回收率,5方法的应用,3结
     陈 磊 Philip Haselberger 田 芳 蔡小堃 毛颖异 刘 爽 赵艳荣 王 硕* 关 岩*

    (1 雅培营养品上海研发中心 上海 200233

    2 雅培营养品 美国哥伦布 OH43219

    3 南开大学医学院 天津 300350)

    母乳寡聚糖(Human milk oligosaccharides,HMOs)是母乳中重要的营养物质与活性成分[1]。母乳寡聚糖不仅能抑制婴儿肠道内有害菌的粘附能力,提高婴儿免疫力[2],还能促进肠道内益生菌的生长,改善胃肠道微生态[3-5]。母乳中的寡聚糖约有200多种,可定量分析的约有30多种[6-7]。HMOs按照单糖组成可分为3类:岩藻糖基化的中性HMOs,非岩藻糖基化的中性HMOs与唾液酸化的酸性HMOs。其中3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose,3-FL)与 2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL)、乳糖-N-新四糖(lacto-N-neotetraose,LNnT)与乳糖-N-四糖(lacto-N-tetraose,LNT)、6’-唾液酸乳糖(6’-sialyllactose,6’-SL)与 3’-唾液酸乳糖(3’-sialyllactose,3’-SL)分别在3类HMOs中含量较高[8],具有一定的代表性。唾液酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)是构成酸性HMOs的重要单糖衍生物,并且对于促进婴儿的大脑发育,提高婴儿认知能力具有重要作用[9-10]。因此,对于母乳中这6种母乳寡聚糖及唾液酸的快速定量分析具有重要意义。

    目前,对于母乳寡聚糖的检测方法主要有高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)法[11-12]、液相色谱-质谱联用(Liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)法[13-14]、核磁(Nuclear magnetic resonance,NMR)法[15]以及离子色谱(Ion chromatography,IC)法[8,16-17]。 采用HPLC法通常需对样品衍生后测定,操作繁琐且重复性较差。LC-MS法由于乳品复杂的基质导致回收率不理想,并且很难找到合适的内标消除误差。NMR法的样品需求量较大,并且灵敏度较差,不适用于母乳中寡聚糖的检测。近年来,IC法由于不需要样品的衍生在糖类检测方面有广泛应用,对于母乳寡聚糖的检测也多有报道。然而就目前报道的方法,仍有两个方面需要改善 ......

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