夏义苗 陈复生 郝莉花 张丽芬 辛 颖

    (河南工业大学粮油食品学院 郑州 450001)

    植物油能为人体正常新陈代谢提供必需脂肪酸、脂溶性维生素、酚类等有益物质[1]，作为良好的烹饪媒介，是人们日常生活中不可或缺的重要组成部分。2018年全球共种植大豆约12 295万hm2，其中78%为具有除草剂抗性的转基因大豆[2]，大豆油产量仅次于棕榈油，是世界第一大食品用植物油[3]。我国进口大豆主要来源于美国、巴西和阿根廷等这些转基因大豆种植大国[4-5]。由于我国农村农业部规定转基因大豆禁止直接用于人体可食用蛋白的加工，因此进口大豆几乎均被用于大豆油的生产，2018年我国大豆进口约8 300万t，自产大豆约1 590万t，相应大豆油消费量高达约1 588 万 t，远高于菜籽油(约 830 万 t)、棕榈油(约451 万 t)和花生油(约 302 万 t)等[2]，转基因大豆油在我国植物用油中排首位。

    随着民众对转基因大豆油关注度的持续高涨，我国相关政府部门对转基因产品标识制度的建立和完善也愈加重视，科学完善的标识制度不仅有助于促进大豆油市场健康有序的发展，亦可使消费者的知情权和自主选择权得以保障[6-7]。标识制度的顺利执行依赖于对相关转基因食品精准的检测手段，不同的化学方法(同位素标记、光谱、色谱等)和生物方法(DNA检测等)均被大量尝试应用于食用油的品质鉴定、溯源或转基因检测中，而油料作物的栽培地点、气候和环境等因素的变化均会显著改变油籽的化学成分组成，这使得基于化学方法的食用油检测技术难以获取用于区分的临界值，且灵敏度有限[8-10]。而DNA检测方法如PCR、real-time PCR等灵敏度高，特异性好，正在越来越广泛地被应用于食用油的掺伪、溯源及转基因检测中[11-12]。近年来我国亦陆续出台了多项标准、法规来引导DNA检测技术在大豆油转基因成分监测中的应用[13-16]。

    DNA本身属于水溶性分子，复杂的油脂精炼工艺、储存过程、油脂氧化作用、核酸酶的存在等均会在不同程度上破坏DNA结构[17-18]，被提取DNA中的蛋白、多酚、油脂或色素等残留亦会抑制PCR等反应[19-20]。为了提高被提取DNA的纯度和数量，保障后续PCR等试验顺利开展，预防假阴性检测结果的出现，本研究对国内外报道的大豆油DNA提取方法进行比较分析，将其有益经验进行总结，以期促进DNA检测技术更好地服务于大豆油转基因监测工作，为政府标识制度的完善和实施提供参考。

    1 大豆油DNA提取方法

    1.1 DNA水相浓缩 ......