喷雾干燥法制备植物乳杆菌ZJ316细菌素
辅料,食盐,工作效率,1材料与设备,1菌种,2主要试剂和药品,3培养基,4主要仪器和设备,2试验方法,1菌种活化,2植物乳杆菌ZJ316发酵上清液制备,3蛋白质浓度的测定,4样品效价与比活力的测定,5喷雾干燥辅料的选择
周青青 王月姣 顾 青 郦 萍(浙江工商大学食品与生物工程学院 浙江省食品微生物技术研究重点实验室 杭州 310018)
近年来,随着广谱抗生素的过度使用引起的环境污染、抗生素耐药性增强等问题日趋严重。禁用抗生素的呼声响彻世界各地。欧盟等发达国家限制使用抗生素,并对产品中使用抗生素的检测标准逐步提高。减少抗生素的滥用,创制安全、绿色、无毒、高效的新抗菌剂迫在眉睫[1]。
细菌素(Bacteriocins)是一类由细菌核糖体合成,通过在靶细菌细胞膜上形成通道或直接抑制靶细菌细胞某些功能而高效发挥杀菌作用的抗菌肽[2-3]。与传统抗生素相比,细菌素抗菌活性强,不易产生耐药性,无毒副作用,无污染[4]。研究表明,细菌素对多种抗生素耐药性致病菌有显著抑杀效果。细菌素Lacticin3147[5]能有效抑制抗二甲氧基苄青霉素的“超级细菌”耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA,methicillin-resistant S.aureus)、抗万古霉素的粪肠球菌VRE(vancomycin-resistant Enterococcus);羊毛硫细菌素MutacinB-Ny266能抑制MRSA、奈瑟氏球菌等多重耐药菌的生长[6]。细菌素有望成为替代抗生素的新一代绿色安全抗菌剂,近年来逐渐成为全球关注的热点。
细菌素产量低、生产成本高,是限制当前大部分细菌素开发和产业化应用的重要原因。为提高细菌素生产效率,现已出现一些工业生产的方法,如过滤法[7]、喷雾干燥法[8]、吸附法[9]等。过滤法简单、快速、成本低,得到的细菌素产品质量稳定,活性较好。喷雾干燥法制备细菌素时,通过调整辅料、进口温度等参数来提高细菌素产品的质量。利用pH吸附法可获取大量的细菌素[10-11],此方法操作简单,产品得率较高,然而试验用的有机试剂会对环境造成污染。
本实验室研究人员从健康新生婴儿粪便中分离筛选得到的植物乳杆菌 ZJ316(Lactobacillus plantarum ZJ316)产生的细菌素具有广谱抑菌性,可抑制或杀死大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、单增李斯特氏菌和少许真菌等致病菌[12]。索成等[13]利用植物乳杆菌ZJ316发酵液代替抗生素乙酰甲喹喂养刚断奶的仔猪,使仔猪腹泻率和死亡率显著降低,日增重增加,肠道菌群的结构改变,猪肉品质改善。在前期研究基础上,利用喷雾干燥的方法建立细菌素制备体系,为高抑菌活性细菌素规模化生产打下基础,推进细菌素在食品工业中的应用。
1 材料与设备
1.1 菌种 ......
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