李 豪 吴嘉南 陈启和

    (浙江大学食品科学与营养系 杭州 310058)

    桦褐孔菌(Inonotus obliquus)，亦称白桦茸，是一种生长在白桦树上的药用真菌，属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属。主要分布于俄罗斯、芬兰等北纬40°～50°的地区和我国的黑龙江大兴安岭、吉林长白山一带[1]。从16世纪以来，俄罗斯、波兰、芬兰等国家的民间就广泛使用桦褐孔菌来治疗各种疑难杂症，如各种癌症、心脏病和糖尿病等[2]。

    桦褐孔菌含有多糖、三萜等多种化合物。其中的三萜类化合物是由数个异戊二烯去掉羟基后首尾相连构成的物质。天然的三萜类化合物的前体主要是鲨烯，已发现约200多种结构[3]。三萜的药理研究表明：三萜具有抗癌，抗炎，抗病毒，免疫调节保肝等多种活性[4]。白桦脂酸(Betulinic acid，BA)，又名桦木酸，是三萜中非常重要的一种。近年来的研究表明，白桦脂酸具有诸多的生物活性，如抗肿瘤、抗 HIV[5]、抗炎[6]、抗菌、抗疟疾等[7]。大量试验表明白桦脂酸具有广泛的抗肿瘤活性，其能诱导多种肿瘤细胞凋亡，包括白血病细胞[8]、脑瘤[9]、神经外胚层瘤[10]、前列腺癌[11]、卵巢癌[12]、乳腺癌[13]、肺癌、结肠癌[14]以及宫颈癌[15]等细胞。白桦脂酸可以选择性地杀死人类癌细胞而不杀伤健康细胞[16]，同时还具有作用机制特异、分子质量小、低毒性等优点，有广泛的应用开发前景，是一类很有潜力的药物先导化合物。

    目前，从高等真菌中直接提取三萜，已报道的有从灵芝、樟芝[17]中提取，也有报道从桦褐孔菌[18]中提取，而从高等真菌中提取白桦脂酸鲜有报道，已知的仅有通过黄绿蜜环菌进行生物转化[19]。目前对桦褐孔菌的液体深层发酵主要集中在生物量、多糖和多酚的测定，对三萜及白桦脂酸的研究报道较少。之前从高等真菌中得到的三萜和白桦脂酸的产量非常低，希望找到一种更为高效的提高三萜和白桦脂酸产量的方法。

    最近的研究表明，法尼醇作为一种群体感知分子，可以通过促进多糖生物合成和调节菌丝体形态来显著增加云芝中的胞外多糖产量[20]。然而，目前对于法尼醇的研究主要集中在白色念珠菌[21]，对桦褐孔菌发酵过程的研究目前还没有报道。本试验将主要探讨法尼醇对桦褐孔菌发酵过程中生物量、三萜和白桦脂酸产量的影响。

    1 材料和方法

    1.1 菌种、试剂

    桦褐孔菌 (Inonotus obliquus) 菌株 (编号CFCC 83414) ......