二烯丙基二硫醚对产志贺毒性大肠杆菌毒力基因表达及生物学特性的影响
游动,1材料与方法,1供试菌种,2材料与试剂,3仪器与设备,4试验方法,2结果与分析,1DADS对大肠杆菌的最低抑菌浓度影响,2RNA提取的结果,3二烯丙基二硫醚对大肠杆菌毒力基因表达的影响,4
李鑫鑫 杨春雪 吴虹燕 魏丽娜 侯红漫 张公亮(大连工业大学食品学院 辽宁大连 116034)
食用香料是一类能增添食物香味和香气的食品添加剂[1]。在食用香料中,含硫香料占据非常重要的位置。由于硫的香气阈值低,特点强,体积小,可广泛应用于食品香精,特别针对肉类风味的不足,对提高风味质量起重要作用。其中硫醚的化合物是含有R-(S)n-R'结构,在可食用含硫化合物这一类中含量最多的物质[2]。二烯丙基二硫醚(Diallyl disulfide,DADS)在葱属植物中比较常见,为大蒜素中存在硫醚的有效成分之一,是绿色、安全的天然添加剂[3],并且具有特有的风味及良好的抑菌、抗肿瘤、抗癌等特性[4]。
产志贺毒性大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)能引发一系列的人类疾病,包括出血性肠炎(HE)、水样腹泻、溶血性尿毒综合征(Hemolytic-uremic syndrome,HUS)、血小板减少性紫癜(TTP)等。截至目前,由STEC引起的胃肠道疾病的爆发情况显示,这种病原体已经成为威胁人类健康最重要的病原体之一[5]。至今,已报道的由STEC引发的人类疾病,除了包含O157∶H7血清型之外,还有其它血清型,例如:O111,O26,O146 等,也占有重要比例[6],因此,非O157产志贺毒性大肠杆菌的研究也尤为重要。STEC相关毒力因子的表达是其致病性的关键,志贺毒素(Shiga toxin,stx)是主要的毒力因子,Stx 家族由Stx1基因和Stx2基因组成,能够特异结合到许多组织的内皮细胞,从而引发各种疾病[7]。eaeA是紧密黏附素基因,它编码的蛋白有助于细菌黏附在肠黏膜不被排出;ehxA基因编码EHEC溶血素(EHEC-hemolysin,ehxA)是一种用普通方法检测不到的特异性溶血素,与出血性肠炎等疾病密切相关[8]。
本文以二烯丙基二硫醚为试验原料,探究DADS对大肠杆菌的作用机理及生物学特性,研究其对非O157产志贺毒性大肠杆菌的抑制作用。选取其亚抑菌浓度对大肠杆菌作用,采用实时荧光定量PCR的方法,探究非O157产志贺毒性大肠杆菌中典型毒力因子stx2,eaeA和ehxA的表达情况,研究其对大肠杆菌游动能力的影响,为后续研究提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌种
产志贺毒性大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)编号:CICC 10670 ......
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