丛艳君 刘家琦 于晓凤 吕晓哲 李 晔

    (1 北京工商大学食品与健康学院 北京食品营养与人类健康高精尖创新中心 北京100048 2 北京工商大学食品与健康学院 食品添加剂与配料北京高校工程研究中心 北京100048)

    大约有65%的牛乳过敏病人对酪蛋白过敏，而对酪蛋白过敏的患者主要对αs1-酪蛋白产生过敏反应[1]。本课题组前期通过ELISA、免疫印迹试验研究发现αs1-酪蛋白是我国牛乳过敏患者潜在的过敏原[2]。通过查阅国内外文献发现，目前对牛乳αs1-酪蛋白的检测和评价主要是用体外方法，体内研究报道较少[3-4]。

    目前报道的用于过敏性食品评价的动物模型有狗、豚鼠、小鼠和大鼠，最优模型还在研究筛选中[5-11]。狗的肠道解剖、生理和营养需求与人类相似，豚鼠的皮肤、胃肠道的解剖学、生理学和免疫学也与人类相似[12]，然而这种动物与啮齿类动物相比存在一些缺点，如动物喂养费用昂贵、品种有限、市售的免疫试剂缺乏以及漫长的致敏过程(18个月)[13]。经口致敏的牛乳过敏动物模型主要用的是豚鼠[14-15]，然而对于评价蛋白质的致敏性，它不是一种合适的动物模型，因为豚鼠对蛋白质的免疫反应不同于人类[15]，且缺少合适的研究豚鼠免疫系统的工具[12]。与其它动物模型相比，大鼠是毒性试验常用的实验动物之一，具有许多优点[16]。棕色挪威大鼠因与IgE 的高反应特性，故被广泛用于食物过敏的研究(使用或不使用佐剂)。转录分析方法表明小鼠和人类样本之间表现出显著的一致性，特应性皮炎的研究表明小鼠和人类样本在基因表达谱中表现出高度的同源性[17]。此外，小鼠的体积小，繁殖周期短，免疫学特性好。在复杂的过敏反应机制中，还没有找到一种可以定量蛋白质潜在过敏性的稳定的标记物[18]。已经报道的食物过敏动物模型存在诸多不同，如过敏程度、致敏途径、致敏原的类型及用量不同，另外佐剂使用类型及用量也不同[19-22]，这就很难用已有的模型进行食物致敏性评价及治疗方法的筛选。BALB/C 小鼠是以Th2 型细胞应答为主导的，对过敏原更易感而能够产生高效价的IgE，常被用于食物过敏反应的研究[23-24]。有研究显示雌性小鼠的免疫反应性比雄性小鼠更强[25]。

    本研究旨在建立αs1-酪蛋白致敏的BALB/C小鼠模型基础上，通过测定小鼠特异性IgE 抗体、肥大细胞蛋白酶、组胺、细胞因子水平，并进行临床和病理切片观察，深入研究αs1-酪蛋白对机体的致敏机理，为评价αs1-酪蛋白致敏风险提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 ......