靳 妲 马微微

    (1 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 哈尔滨150030 2 黑龙江中医药大学 哈尔滨150040)

    他汀类药物是临床上常用的改善高胆固醇血症的药物，然而长期服用他汀类药物可能造成肌肉疼痛、疲劳，还可能提高糖尿病的风险[3-4]，因此益生菌疗法走进人们的视野。联合国粮农组织和世界卫生组织将益生菌定义为“当达到一定数量时，对宿主有益的活性微生物”[5]。乳酸菌在人类肠道系统中的代谢和功能性质对人类的健康有很大的益处。有很多研究证明益生菌具有降胆固醇的作用。2009年，Jungae Jeun 等[6]在基因水平上证明了植物乳杆菌具有明显的降胆固醇功效。2016年，Damodharan K 等[7]用瑞士乳杆菌发酵酸乳，在体内和基因水平上证实乳杆菌的降胆固醇作用。

    植物乳杆菌KLDS1.0386 分离自中国内蒙古地区传统发酵乳制品，有研究证明KLDS1.0386 具有体外降胆固醇能力、良好的胃肠拮抗性和粘附性[8-9]。本试验通过建立C57BL/6 小鼠高胆固醇模型研究此菌株的降胆固醇能力，利用蛋白免疫印记法测定其对小鼠肝脏胆固醇调节的几个关键基因表达的影响，为开发具有降胆固醇功能的益生菌提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    总胆固醇检测试剂盒、甘油三酯检测试剂盒、高密度脂蛋白检测试剂盒、低密度脂蛋白检测试剂盒，上海科华生物工程股份有限公司；CYP7A1一抗、LDLR 一抗、FXR 一抗、SREBP2 一抗，Santa Cruz；HMGCR 一抗，Abcam；β-actin 一抗，北京博奥森；普伐他汀钠片，第一三共制药有限公司；其它试剂均为国产分析纯。

    1.2 设备与仪器

    BCN1360 型生物洁净工作台，北京东联哈尔仪器公司；DHP-9082 型电热恒温培养箱，上海一恒科技有限公司；全自动高压灭菌锅HVE-50，HIRAYAMA 公司；超低温冰箱，SANYO 转移脱色摇床，海门其林贝尔仪器制造有限公司；低温离心机，Eppendorf 公 司；UVP 凝 胶 成 像 系 统，Thermo公司；电泳仪，北京六一；半干转膜仪，ATTO 公司；紫外-可见分光光度计，MILTON ROY COMPANY公司；超纯水仪，北京康铭泰克科技发展有限公司；美国UVP 分析仪。

    1.3 乳酸菌与培养基

    植物乳杆菌KLDS1.0386(Lactobacillus plantarum)由东北农业大学乳品科学教育部重点实验室提供 ......