鲽鱼骨胶原蛋白的结构及流变学特性
冻干,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3鲽鱼鱼骨预处理,4酸法提取,5酶法提取,6胶原蛋白粗提液的纯化,7鲽鱼骨胶原蛋白的结构分析,8流变学分析,2结果与分析,1紫外光谱的分析,2红外光谱分析,3SDS-PAGE分析
蔡路昀 史 航 曹爱玲 周小敏 张宇昊 赵元晖 励建荣*(1 生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心渤海大学食品科学与工程学院 辽宁锦州121013 2 杭州海关 杭州311208 3 浙江兴业集团有限公司 浙江舟山316101 4 西南大学食品学院 重庆400715 5 中国海洋大学食品科学与工程学院 山东青岛266100)
胶原蛋白(collagen)在动物体内含量多、分布广,约占哺乳动物总蛋白的25%~30%,构成了全身大部分的结缔组织,肌腱、眼球、血管、骨骼也含有大量的胶原蛋白。胶原蛋白具有低免疫原性、相容性、可降解性、凝血性等生物特性,其优良的性质已被应用到生物医学材料、组织工程、烧伤、美容、食品等领域并占有重要地位。目前已发现28种胶原蛋白,最为常见的是纤维状的Ⅰ型胶原蛋白[1]。研究发现,水产动物体内胶原蛋白含量高于陆生动物,且种类较少,主要由分布在鳞、鳔、肌肉、皮、骨等处的Ⅰ型、脊索和软骨的Ⅱ型、Ⅺ型以及肌肉的V 型组成,其中Ⅰ型胶原蛋白富含丙氨酸和糖结合型的羟赖氨酸[2]。
鲽鱼(Pleuronichthys coconuts)又称比目鱼,是温带海域重要的经济鱼类。鲽鱼含有丰富的多不饱和脂肪酸,易被人体吸收,有助于降低血液中胆固醇浓度[3]。目前国内外对鲽鱼的研究主要侧重于养殖育种方面。随着养殖技术的提高,鲽鱼产量稳步上升。然而目前我国海水鱼加工科技含量低,加工过程中会产生大量的下脚料如鱼皮、鱼骨等,尤其是鲽鱼鱼骨,其质量约占整鱼的40%,这些下脚料常常被丢弃或以低价卖给鱼粉厂,简单做成鱼粉和肥料等低附加值产品,资源和副产物的利用程度低,造成巨大的经济损失,严重制约着海水渔业的可持续发展。
本文以鲽鱼加工副产物鱼骨为材料,采用酸法和酶法对鲽鱼骨胶原蛋白进行提取纯化,对其结构性质与流变学特性进行分析,以期为鲽鱼骨胶原蛋白的开发利用及工业化应用提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
鲽鱼鱼骨,由大连天宝绿色食品股份有限公司提供;胃蛋白酶(50 万U/g),吉宝(青岛)生物科技有限公司;丙烯酰胺 (Acr)、四甲基乙二胺(TEMED)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、考马斯亮蓝R-250(优级纯)、标准蛋白(分子质量6.5~200 ku),上海索莱宝公司;NaOH、异丙醇、冰乙酸、KBr、NaCl、EDTA-2Na,锦州国药器化玻有限公司。
1.2 仪器与设备 ......
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