刘慧君 黄 菲 张瑞芬 董丽红 邓媛元 刘 磊 魏振承 张名位*

    (1 华南农业大学食品学院 广州510642 2 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所 农业农村部功能食品重点实验室广东省农产品加工重点实验室 广州510610)

    龙眼俗称“桂圆”，是传统药食两用水果，据《神农本草经》、《本草纲目》等古医书记载，其具有养血安神、益智宁心、补益心脾、壮阳益气、延年益寿等功效[1]。现代研究发现，水溶性多糖是其果肉的主要活性成分之一[2-3]，具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化和抗炎等多种功能活性[4-6]。基于龙眼生物活性机制的研究及其开展精深加工的需要，开展龙眼果肉多糖的提取技术研究显得至关重要。

    超微粉碎技术是近期出现的一种提取技术，其可以将原料粉碎至1nm～100μm 粒径的微小颗粒，从而改变原料表面结构，增加原料与提取剂的接触面积，实现高效提取。超微粉碎因具有高效、节能等特点而逐渐被应用于功能性成分的提取制备。有研究表明超微粉碎辅助提取多糖能改变多糖的分子质量、化学组成等，从而影响其生物活性[7-8]，然而，超微粉碎技术对龙眼果肉多糖的理化性质及其免疫调节活性的影响尚鲜见报道。此外，生物酶解技术因具有特异性、高效性被应用于活性多糖的提取。易阳[9]和贺寅[10]等分别优化建立了超声波-酶解、酶法提取龙眼多糖的工艺，而对生物酶解与物理的超微粉碎相结合后，两者对龙眼多糖的得率、理化性质及其免疫活性的影响尚不知晓。本研究比较了热水浸提法、超微粉碎提取法和超微粉碎-酶法提取技术对龙眼果肉多糖的提取率、理化性质以及免疫活性的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    龙眼品种“储良”，由广东省农业科学院果树研究所提供，于2016年9月采自其实验果园。新鲜龙眼采用热风干燥得到龙眼干。

    葡萄糖醛酸、葡聚糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖标准品，甲基噻唑基四唑(MTT)，纤 维 素 酶(Cellulase from Aspergillus niger，Sigma-22178)，脂多糖(LPS)和青链霉素，购自美国Sigma 公司；间羟基联苯，购自日本TCI 公司；NO 试剂盒、考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，购自南京建成科技有限公司；TNF-α、IL-6 和IL-1β 酶联免疫试剂盒，购自深圳欣博盛生物科技有限公司；其它试剂均为国产分析纯。

    小鼠巨噬细胞株RAW264.7 由中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库提供，本实验室继代培养。

    UV-1800 紫外可见分光光度计 ......