渤海虾酱中益消细菌的分离和鉴定
吲哚,芽孢,测序,1材料与方法,1试验材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1细菌菌株的形态学初步鉴定,2细菌菌株的生理生化鉴定,3对细菌的16SrDNA序列基因片段的扩增,4测序结果的BLAST比对,5基于16S
陈笑语 张力元 纪海玉 刘安军(天津科技大学食品工程与生物技术学院 天津300457)
渤海虾酱酱色鲜艳,酱质细腻,组织均匀,气味鲜香、口感好,酱香味和虾鲜味浓郁,含有优质的蛋白质、钙、铁、硒、维生素A 和脂肪酸等营养元素。虾酱中还有虾青素和甲壳素两个重要的因子,其中被称为超等维生素的虾青素,具有维生素A、维生素E 和β 胡萝卜素,可以改善免疫力,阻挡紫外线的伤害,提高视力能力,还可避免不饱和脂肪酸被氧化。甲壳素具有降血压、降低胆固醇以及抗菌等功能。
近年来研究发现,虾酱的风味和保健活性与其中的微生物菌群密切相关。孙业盈等[1]通过研究蜢子虾酱,分离鉴定出一株嗜盐菌,经鉴定确定为盐脱氮枝芽孢杆菌,其属于枝芽孢杆菌属。连鑫等[2]对虾酱中呈味优势菌种进行挑选、分离鉴定,发现一株产香酵母,为季氏毕赤氏酵母,分析结果表明:菌株耐受高盐环境,对菌株进一步纯化,提高耐盐性,用于低盐虾酱的发酵,提高虾酱发酵香气,控制产品质量。连鑫等[3]从虾酱中分离出一株产蛋白酶霉菌,确定为黑曲霉,通过研究其在虾酱生产中各种因素对于风味变化的影响,对其产蛋白霉菌进行改造,为传统发酵产品的工业化生产提供优质的菌株。
传统虾酱中由于含有多种多样的微生物菌群,因此形成了比较稳定的微生物系统[4],风味良好,营养丰富,具有多种保健功能。鉴于目前对虾酱的研究主要集中在风味物质的相关菌群方面,而对其益消细菌鲜有研究报道。本研究用营养琼脂培养基对渤海虾酱中的细菌进行分离,采用PCR 测序技术对其进行鉴定,并研究该菌株的耐热性,为虾酱在食品加工过程中的合理利用提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试剂
渤海虾酱:黄骅市王曼老李水产品有限公司。
培养基:PDA 培养基、营养琼脂培养基、高氏一号培养基、马铃薯蔗糖MRS 培养基、营养肉汤培养基,购买于北京路桥技术有限责任公司。
试剂:无水乙醇,天津市科密欧化学试剂有限公司;27F 引物和1492R 引物,北京鼎国盛世有限公司。
1.2 仪器与设备
电泳仪,美国Thermo 公司;冷冻离心机,美国Thermo 公司;电热恒温培养箱,北京中兴伟业仪器有限公司;真空冷冻干燥机,北京博医康实验仪器有限公司。
1.3 试验方法
1.3.1 传统虾酱生产工艺 工艺流程:原料去杂洗涤→装入瓷缸→加入盐度为25%~30%的盐水→拌匀→控制温度25~30 ℃发酵→30 d 后油、酱分离→包装巴氏灭菌 ......
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