食品检测用4 种病原菌基因组试剂盒提取方法的比较与优化
毒力,金黄色,纯度,1材料与方法,1材料和试剂,2仪器与设备,3试验方法,2结果与分析,1两种细菌基因组试剂盒提取基因组效果比较,2优化国产细菌基因组提取试剂盒法提取病原菌基因组,3优化后的试剂盒法提取的
杨金玉 杨焕蝶,2 陈相艳 王易芬 朱丽萍 陈蕾蕾,2*(1 山东省农业科学院农产品研究所 山东省农产品精深加工技术重点实验室农业农村部新食品资源加工重点实验室 济南 250100 2 山东师范大学生命科学学院 济南 250014 3 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院 山东省微生物工程重点实验室 济南 250353)
食源性病原菌是可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌,威胁着人类的健康,能引起严重的食品安全问题。食品致病菌种类较多,常见的有致泻大肠埃希氏菌(Diarrheagenic Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonella spp.)和单增李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)等。建立准确、灵敏、快速、特异性的检测方法用于食品致病菌的检测,对预防和控制食品微生物食物中毒事件的发生起重要作用。
致泻大肠埃希氏菌是全球细菌性食物中毒的主要致病菌,出血性大肠埃希氏菌O157:H7 是常见的致泻大肠埃希氏菌中的一种,能引起人类出血性结肠炎或血性腹泻,并可进一步发展为溶血性尿毒综合征,其造成的死亡率达10%~30%[1-2]。单核细胞增生李斯特氏菌,简称单增李斯特氏菌,是一种人畜共患病的病原菌,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。食品中存在的单增李斯特氏菌对人类的安全具有威胁,该菌在4 ℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。临床症状为孕妇感染和新生儿脓血症等[3-4]。金黄色葡萄球菌也是引起食物中毒的重要病原菌,其毒力与肠毒素密切相关[5-6]。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题,在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒,占整个细菌性食物中毒的33%,加拿大则更多,占到45%[7]。沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌。蛋、鲜乳、家禽和肉类产品是沙门氏菌的主要传播媒介,据统计,在世界各国的细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首[8-9]。
当下微生物污染引起的疾病暴发模式也从局部范围集中式小暴发向全社会范围以散点病例组成的大暴发转变。为有效识别大暴发,快速、准确的食品病原菌检测方法迫在眉睫。传统培养法耗时长,已不能满足目前食源性病原菌的检测。目前发展形成了多种快速检测方法,这些方法主要是基于分子生物学的聚合酶链反应PCR 法[10]、环介导等温扩增法[11-12]和基于免疫学的快速检测方法-酶联免疫吸附法[13]等。目前基于分子生物学最常用的有普通PCR 法、荧光定量PCR 法和近年来兴起的数字PCR 法等 ......
您现在查看是摘要页,全文长 14162 字符。