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编号:40113
环境对蜂房哈夫尼亚菌群体感应基因haII/haIR表达的影响
http://www.100md.com 2020年8月3日 2020年第7期
1材料与方法,1试验菌株,2主要试剂,3主要仪器,4试验方法,5不同环境对蜂房哈夫尼亚菌haI,R系统表达的影响,6数据分析,2结果与分析,1蜂房哈夫尼亚菌群体感应haII,haIR基因的验证,2荧
     赫彬彬 李婷婷 梅永超 王当丰 孙晓佳 刘 楠 励建荣*

    (1 渤海大学食品科学与工程学院 辽宁省食品安全重点实验室 辽宁锦州121013 2 生物技术与资源利用教育部重点实验室(大连民族大学) 辽宁大连116600)

    微生物是导致水产品腐败变质的主要原因之一,其生长代谢过程中能够分泌胞外酶、嗜铁素、有色物质以及形成生物被膜等致腐因子[1]。研究表明,微生物主要通过群体感应系统(Quorum sensing,QS)调控致腐因子的产生,进而发挥其致腐能力[2]。该系统通过产生并释放一种被称为自体诱导物的小分子(Autoinducer,AI),使微生物能够感知外界生存环境的变化,并通过启动特定基因的表达对环境变化进行反馈,从而维持自身生长[3-4]。微生物腐败特性的表达不仅受到QS 系统的调控,也受pH 和营养状态等外界环境因素的影响。如产生志贺毒素的大肠杆菌(Escherichia coli) 在pH 3.8 时无法存活,pH 4.1 时可降低志贺毒素产量。可通过调节环境因素来抑制大肠杆菌毒力因子的表达[5]。

    由于微生物适应环境的能力不同,所以食物腐败的速度和程度也随着贮藏条件的改变而发生变化[6]。蜂房哈夫尼亚菌(Hafnia alvei)是兼性厌氧型革兰氏阴性杆菌,也是肉类和鱼类低温贮藏过程中的腐败菌,其能形成生物膜以抵抗外界不良环境的变化,进而维持自身生长[7]。本实验室前期从腐败大菱鲆中分离得到一株蜂房哈夫尼亚菌,研究发现其具有相关腐败特性,如生物被膜的形成以及分泌信号分子的能力等特性均依赖于QS系统的调控,且外源环境的改变对其生物被膜的形成有一定影响[8]。Wang 等[9]发现沙门氏菌生物膜调控基因的表达受培养基的基质成分影响,当其在实验室胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中生长7 d 时,其生物膜调控基因的表达量增加;而当在解冻肉汤(MTLB)中生长时,该基因表达受到抑制。由于蜂房哈夫尼亚菌在冷链运输等低温贮藏条件下仍可生长,因此,探究不同环境条件对蜂房哈夫尼亚菌群体感应基因表达的影响尤为重要。

    本文以haII/R 系统为研究对象,利用转录组学技术探讨不同环境因素条件(碳源、pH、NaCl 浓度、温度) 对蜂房哈夫尼亚菌群体感应调控基因haII/haIR(NCBI GenBank:AF503776.1)表达的影响,以期明确QS 基因表达差异与各环境因素的关系,进一步研究如何抑制蜂房哈夫尼亚菌等致腐菌的致腐能力,建立靶向控制群体感应系统,为水产品保鲜新技术提供理论数据支撑。

    1 材料与方法 ......

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