植物乳杆菌ZJ316培养基优化和高密度培养的研究
酵母粉,补料,菌体,1材料与方法,试剂与仪器,2试验方法,2结果与分析,1发酵培养基的优化结果,2Placket-Burman设计筛选对乳酸菌高密度培养影响显著的因素,3最陡爬坡试验,4中心组合设计及响应面分析
陈百莹 郑 苗 邓泽元 李红艳(南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室 南昌330047)
植物乳杆菌ZJ316 (Lactobacillus plantarum ZJ316)与人们的生活息息相关[1],具有一定的保健功能[2],可以平衡肠道内菌群[3],增强免疫力[4],促进营养吸收,能通过胃和肠道发挥有益作用[5-6],已在功能性食品市场普及,受到越来越多消费者的重视和喜爱。
在乳制品、肉类、发酵果汁和许多蔬菜发酵中,人们利用乳酸菌作为发酵剂,从而获得许多发酵制品[7]。一般认为,菌体密度达到108~109的菌液才适合做固体发酵剂。在发酵剂制备过程中,采用菌体高密度培养的方式,既可以提高菌体密度,又能降低生产设备成本。有必要对植物乳杆菌进行高密度培养[8]。高密度培养(High cell-density culture,HCDC)是指运用一定的培养技术和设备,以较低成本显著提高菌体密度,并获得较高的比生产率的方法[9]。菌体的高密度培养主要包括培养基和培养条件的优化。熊涛等[10]采用高密度培养技术培养植物乳杆菌,菌体浓度可达到9.3×109CFU/mL。在采用高密度培养技术培养植物乳杆菌的过程中,为了调节培养环境中营养物质的浓度,常使用补料分批培养的方法。为使补加物质能够最大限度地促进菌体生长或产生代谢产物,根据菌体生长和初始培养基的条件,在分批培养的某些阶段以某种方式间歇或连续地补加一定物料,使菌体及其代谢产物的生产时间延长。补料分批培养(又称流加培养) 应用范围十分广泛[11]。
本研究对本实验室筛选和保藏的一株植物乳杆菌ZJ316 的培养基配方进行优化。同时研究培养基初始pH 值、菌种接种量、溶氧量、培养温度、分批补料策略和菌体收集条件对植物乳杆菌菌体密度的影响,得到植物乳杆菌ZJ316 的高密度培养优化方法。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
1.1.1 菌种 植物乳杆菌ZJ316,由本实验室保藏。
1.1.2 培养基 MRS 培养基:蛋白胨10 g,牛肉膏10 g,酵母膏5 g,柠檬酸二铵2 g,葡萄糖10 g,Tween-80 1 mL,磷酸氢二钾2 g,MgSO4·7H2O 0.58 g,MnSO4·H2O 0.25 g,蒸馏水加至1 000 mL,pH 6.2 用于乳酸菌培养。以上试剂均购于西陇化工股份有限公司。
1.1.3 仪器与设备 DGG-9140A 型电热恒温鼓风干燥箱,上海森信实验仪器有限公司;HWS-150型恒温恒湿箱 ......
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