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编号:40146
基于DNA-银纳米颗粒比色法高灵敏度检测过氧化氢和葡萄糖
http://www.100md.com 2020年8月3日 2020年第7期
葡萄糖氧化酶,梨汁,1材料与方法,1材料与试剂,2设备与仪器,3DNA-AgNPs的合成,4优化反应时间,5检测缓冲液中的H2O2和葡萄糖,6检测方法的特异性研究,7检测梨汁样品中的葡萄糖,8材料表征
     邓健康 刘亚青 王 硕,2*

    (1 食品营养与安全国家重点实验室 教育部食品营养与安全重点实验室天津科技大学食品工程与生物技术学院 天津300457 2 天津市食品科学与健康重点实验室 南开大学医学院 天津300071)

    近年来,构建食品相关目标物的生物传感器引起研究者的广泛兴趣。由于过氧化氢(Hydrogen peroxide,H2O2)的灭菌功能,常被用作包装材料的消毒剂[1]。葡萄糖天然存在于或人工添加至各种食物基质中。分析葡萄糖含量对于食品质量控制、食品鉴伪有一定意义[2]。测定过氧化氢和葡萄糖含量在食品工业中具有重要的实际意义[3]。监测血液和饮食中的葡萄糖含量对于预防或延缓糖尿病及其并发症(如心脏病、血管疾病和血液循环不良、失明、肾功能衰竭、愈合不良、中风等)的发生至关重要[4]。目前,学者们开发了多种方法检测过氧化氢和葡萄糖,包括电化学方法[5]、高效液相色谱法[6]和表面等离子体共振法[7]。然而,上述方法存在耗时长,需要复杂的操作和昂贵的设备等不足。比色法具有灵敏度高,操作简单,速度快等特点,在微量物质检测方面具有明显优势。

    银纳米颗粒 (Silver nanoparticles,AgNPs)是重要的金属纳米材料,在催化、抗菌和分析等领域得到广泛应用。由于AgNPs 易氧化和聚集,因此需加入稳定剂(如聚合物、有机小分子和纳米颗粒等)使其稳定存在[8]。DNA 保护的金属纳米材料已应用于很多领域。基于某些金属阳离子与DNA 的相互作用,其可作为合成金属纳米材料的模板[9]。DNA 特别是富含胞嘧啶的DNA 链对银离子具有高亲和力。利用不同的DNA 序列和还原剂,金属离子可被还原成不同的金属纳米材料,如银纳米簇[10]、纳米颗粒[11]和纳米环[12]。

    在氧气存在时,葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOx)对葡萄糖具有高选择性,可催化葡萄糖氧化生成过氧化氢[13-14]。基于此原理,研究者们开发了许多葡萄糖传感器用于食品和饮料工业[15]。然而,仅有少数基于银纳米颗粒的比色传感器用于检测过氧化氢和葡萄糖。本研究中,建立了一种基于DNA-AgNPs 的比色传感器,用于高灵敏检测过氧化氢和葡萄糖。在DNA 保护下,用硼氢化钠(NaBH4)还原硝酸银(AgNO3)合成DNA-Ag-NPs。加入过氧化氢后DNA-AgNPs 颜色由黄褐色变为无色,从而实现过氧化氢的比色法检测。在葡萄糖氧化酶作用下,间接测定葡萄糖的含量。为食品中过氧化氢和葡萄糖的检测提供新方法。

    1 材料与方法 ......

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