闫 爽 杨 波 赵建新 张 灏 陈 卫

    (江南大学食品学院 江苏无锡214122)

    双歧杆菌(Bifidobacteria)是人体肠道菌群中一类重要的优势微生物， 与其宿主之间存在复杂的相互作用关系[1]。某些特定的双歧杆菌菌株被证明具有拮抗肠侵袭性致病菌，抑制结直肠癌，抑制炎症性肠病以及缓解便秘等功能[2-5]。

    尽管有大量关于人体肠道微生物组成的研究， 然而关于肠道共生菌和宿主相互作用的分子机制还不十分明确[6]。 有研究提出，共生菌的细胞被膜成分，包括蛋白质和碳水化合物，是微生物与其宿主之间发生相互作用的重要物质基础[7-9]。 胞外多糖是由一些特定菌株产生的一类碳水化合物聚合物，可附着于菌体表面形成一层被膜(荚膜多糖)或者释放到周围环境中[10]。 双歧杆菌的荚膜多糖可通过改变菌体表面的物理性质维持菌体与宿主的共生关系。此外，某些双歧杆菌产生的胞外多糖(Exopolysaccharides，EPS)可提高菌体对胃肠道环境的耐受性， 保护菌体免受宿主免疫系统的影响，同时可对宿主产生免疫调节等多种作用[11-12]。双歧杆菌所产的EPS 可能是其发挥益生功能的物质基础之一[13]。

    短链脂肪酸(Short-chain fatty acid，SCFA)是人体肠道菌群的重要代谢产物， 具有为肠上皮细胞提供能量，促进肠上皮细胞增殖和矿物质吸收，缓解腹泻与便秘，抑制致病菌等多重生理活性[14]。近年来大量研究表明， 短链脂肪酸具有免疫调节功能，对维持免疫稳态起关键作用[9]。 双歧杆菌所产的短链脂肪酸主要为乙酸， 它可保护宿主免受肠道致病菌感染， 同时可被肠道中产丁酸菌利用产生丁酸，发挥抗炎等生理活性[2，15]。

    本研究从婴幼儿、 成年人和老年人的粪便中筛选长双歧杆菌(B. longum)，分析不同菌株的体外特性，包括生长特性、糖发酵特性、产短链脂肪酸和胞外多糖的能力， 并比较菌株胞外多糖合成关键基因——引导型糖基转移酶(Priming glycosyltransferase，pGT)基因的序列及其进化关系，为双歧杆菌特定菌株的筛选以及胞外多糖相关研究提供数据参考。

    1 材料与方法

    1.1 样品采集

    共采集38 份不同年龄段健康志愿者的粪便样品。 其中男性20 名，女性18 名；小于3 岁的婴幼儿14 名，30～50 岁的中年人11 名， 大于60 岁的老年人13 名。将采集的粪便样品置于50 mL 无菌离心管中，添加30 mL 灭菌的30%甘油溶液(含0.05%半胱氨酸盐酸盐)混匀 ......