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编号:40047
绿豆寡肽对脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7的抗炎作用
http://www.100md.com 2020年9月1日 2020年第8期
细胞因子,1材料与方法,1材料与试剂,2主要仪器,设备,3试验方法,2试验结果,1MBPs对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7细胞增殖的影响,2MBPs对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7细胞吞噬能力的影
     于 笛 周 伟 郭增旺 刁静静,2 迟治平 张丽萍,2*

    (1 黑龙江八一农垦大学 黑龙江大庆 163319 2 国家杂粮工程技术研究中心 黑龙江大庆163319)

    炎症是机体针对各种致炎因子如感染和组织损伤而产生的一系列以防御为主的生理性或病理性应答反应,是机体天然免疫的重要组成部分。过度的炎症会对机体造成损害或疾病, 严重时还会危及生命[1-2]。 巨噬细胞是机体固有免疫的重要组成细胞,不仅参与机体的大多数免疫反应,而且在炎症反应过程中具有重要作用[3]。 炎症状态下,巨噬细胞通过分泌细胞因子及抗原提呈等作用影响并调控炎症反应,其自身的吞噬能力也增强,能够杀灭和消化机体内抗原性异物[4-5]。 脂多糖(lipopolyssacharide,LPS)是全身炎症反应综合征的一种重要致病因子, 可与巨噬细胞表面抗原识别受体相结合而刺激细胞, 继而激活多条炎症通路,产生一系列促炎因子,引起机体严重的炎症反应[6-7]。

    有研究显示,大豆、豌豆、羽扇豆等的蛋白水解产物具有调节炎症的潜力。 Vernaza 等[8]发现利用大豆制备的蛋白质水解产物能够显著减弱LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7 中炎性标志物如NO、iNOS、PGE2 的产生。 Millan-Linares 等[9]发现羽扇豆的蛋白质水解产物可以减弱THP-1 巨噬细胞中促炎性细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α 和NO 的产生。 Ndiaye 等[10]发现来源于黄豌豆种子的蛋白质水解产物通过抑制活化的巨噬细胞中NO、TNF-α 和IL-6 的产生来发挥其抗炎作用。绿豆蛋白的水解产物绿豆肽 (mung bean peptides,MBPs)含有多种活性物质。 绿豆肽不仅能提高缺氧耐受力和人体的免疫力,还具有抗氧化性、ACE抑制活性、抗肿瘤、降血压、降胆固醇、改善肾功能等作用[11-15]。 然而,国内关于绿豆肽抗炎作用的研究鲜有报道。 本课题组有关绿豆肽的免疫调节作用已得到证实[16]。 本文通过LPS 诱导巨噬细胞RAW264.7 产生炎症反应, 观察绿豆肽对所产生的炎症反应是否有抑制作用, 为研究绿豆肽的抗炎作用及其机制提供基础理论参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    绿豆寡肽(水解度30%),实验室自制;巨噬细胞RAW264.7,中国科学院上海细胞库。

    绿豆蛋白粉,山东招远市温记食品有限公司;碱性蛋白酶,丹麦诺维信公司;胎牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司;DMEM 培养基,Hyclone;青霉素-链霉素溶液 ......

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