阿魏菇凝集素对小鼠腹腔巨噬细胞免疫活性的影响
依赖性,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1PFLL的分离和纯化,2PFLL对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活性的影响,3PFLL对NO诱导的剂量依赖性和时间依赖性,4PFLL对O2-生成量的影
刘 阳 许程剑,2* 林 丹 梁鹏娟(1 四川旅游学院食品学院 成都610100 2 石河子大学食品学院 新疆石河子832000)
凝集素(Lectin)是专一识别糖并与特定结构糖分子可逆、非共价结合的糖蛋白或蛋白质,从植物、动物、微生物中皆可以分离得到[1]。Yoon 等[2]研究发现从韩国槲寄生[Viscum coloratum(Kom.)Nakai]中分离的凝集素具有免疫调节活性,可增强宿主对抗肿瘤的防御系统, 对肿瘤转移的预防和治疗效果与NK 细胞(natural killer,NK)和巨噬细胞的活化相关。研究表明,大量大型真菌均具有一定凝集素活性[3],可抑制癌细胞增殖,促进机体免疫活性,如阿魏菇[4]、猴头菌[5]、牛樟芝[6]、杏鲍菇[7]等。 在食品领域凝集素一直是各国学者研究的重点[8-10]。
阿魏菇作为目前食用菌中营养含量最高的一种, 其蛋白质含量高达14.9%, 富含不饱和脂肪酸,并含有丰富的维生素及多种矿物质[11],是食用与药用价值并存的珍贵菌类。 李娜等[12]研究发现食用阿魏菇有助于减轻宫颈癌患者化疗后的不良反应,增强对化疗的耐受力。Gong 等[13]研究发现阿魏菇多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用,进而增强其免疫活性,达到抗肿瘤的目的。目前鲜有报道显示阿魏菇凝集素的免疫活性。 本文基于真菌凝集素的研究现状, 采用现代分子生物学技术从阿魏菇中分离得到凝集素, 通过凝集素与巨噬细胞的共培养,检测蛋白的免疫生理活性,探讨真菌凝集素在药用真菌中存在的特点和普遍性。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
阿魏菇,采至新疆清河县。 昆明种小鼠,石河子大学动物实验中心。
二乙氨基乙基纤维素52、 琼脂糖凝胶4B,上海圆创生物科技有限公司; 小鼠TNF-α、IL-1 Elisa 试剂盒,北京诚林生物科技有限公司;噻唑蓝MTT 、RPMI-1640 培养基, 赛默飞世尔科技(中国)有限公司;其它试剂均为国产分析纯级。
1.2 仪器与设备
ENK-PRO 型酶标仪, 美国Bioteck 公司;BT-200E 型恒流泵,上海琪特分析仪器有限公司;BSZ160-LCD 型自动部分收集器, 上海琪特分析仪器有限公司;Ultrospec-5300 型紫外分光光度仪,美国Amersham 公司;真空冷冻干燥系统,日本SHIMADZU;BPN-50CH(UV)二氧化碳培养箱,上海一恒公司。
1.3 方法 ......
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