黑蒜多糖的斑马鱼体内抗氧化、抗炎症活性分析
自由基,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1优化的黑蒜多糖提取工艺,2黑蒜多糖的体外抗氧化能力,3黑蒜多糖的斑马鱼体内活性评价,3结论
郑 岚 马耀宏* 孟庆军 杨俊慧 夏 青 彭 耀 黄金栋 任 鑫(1 齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省科学院生物研究所 山东省生物传感器重点实验室 济南250103 2 莱芜裕源食品有限公司 山东莱芜271199)
黑蒜又名发酵黑蒜,是一种口感软糯,味道酸甜,具有多种保健功效的新型大蒜发酵制品[1]。 由于黑蒜具有提高免疫力[2]、抗氧化[3-5]、抗炎症[6-7]、抗疲劳[8]、调节血糖和血脂水平[9-11]、保护肝脏[12-14]、抗过敏[15]、润肠通便[16]等作用,因此,近年来受到消费者的青睐, 成为大蒜深加工领域最受关注的研究热点[17]。
虽然黑蒜的蒜臭味及辛辣味大大降低, 但是仍有部分消费者不易接受残留的蒜味。 提取黑蒜中的有效成分,将其加工为黑蒜保健品,成为延长黑蒜产业链的有效途径之一。高温、高湿的黑蒜发酵工艺使大蒜发生一系列复杂的变化, 多种有益成分含量显著提高, 其中糖类物质含量升高最为显著[18-19]。大蒜多糖是大蒜中含量较高的活性成分之一,具有多种生物学活性[20],对黑蒜多糖的研究正引起人们的重视。 黑蒜多糖是开发黑蒜保健品的良好材料, 如何有效利用黑蒜多糖的保健价值值得深入研究。 黑蒜多糖的提取方法是黑蒜开发利用的重要技术问题, 而活性评价是研发黑蒜多糖保健品的前提和基础。 本研究采用Plackett-Burman 及响应面试验设计方法优化黑蒜多糖的超声提取工艺, 采用多种体外试验分析黑蒜多糖的体外抗氧化能力。 通过建立斑马鱼氧化应激模型和炎症模型,评价黑蒜多糖的体内抗氧化、抗炎症能力,为黑蒜多糖保健品的开发奠定理论基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
独瓣黑蒜,莱芜裕源食品有限公司提供;Tg(krt4:NTR-hKitGR)cy17系斑马鱼、AB 系斑马鱼、Tg(Lyz:GFP)系斑马鱼,山东省科学院生物研究所药物筛选技术重点实验室提供。
1,1-二苯-2-苦基肼 (DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、甲硝锉,阿拉丁化学试剂公司;三卡因(3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸盐),美国Fluka 公司;Pronase E 蛋白酶,索莱宝生物科技有限公司;活性氧(ROS)试剂盒(DCFH-DA),南京建成生物工程研究所;脂多糖,美国Sigma 公司;磷酸盐缓冲液(PBST)、4%组织细胞固定液(PFA)、吲哚美辛,北京索莱宝科技有限公司;其余试剂均为国产分析纯级。
1.2 仪器与设备 ......
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