柴晓玲 郝雅茹 王佳蕊 李书国

    (河北科技大学生物科学与工程学院 石家庄050018)

    阪崎肠杆菌是一种周生鞭毛、能运动、无芽胞的革兰氏阴性菌，也是一种条件致病菌，能够引起严重的新生儿脑膜炎、 坏死性小肠结肠炎和菌血症，并可能存在严重的神经系统后遗症，在新生儿中的致死率可达50%～80%[1-2]。国际食品微生物标准委员会 (International Committee on Microbiological Standards for Food，ICMSF)将其列为“严重危害特定人群生命， 引起长期慢性实质性后遗症”的一种致病菌[3]。 将阪崎肠杆菌放置并对其危险性进行评估，与最初相比发现：温度25 ℃，放置6 h，阪崎肠杆菌的相对危险性增加30 倍；放置10 h，增加30 000 倍[4]。 其广泛存在于环境和食品中，科学家从多种食物和饮料中分离出阪崎肠杆菌，并发现土壤、水、下水道、动物和人类排泄物以及植物的根和径等处都有阪崎肠杆菌[5-7]。此外，有报道临床也是其来源之一[8-11]。

    目前， 阪崎肠杆菌的检测方法有传统检验方法、分子生物学法、电化学免疫传感器法、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱检验法、 金标快速诊断法以及免疫学检测方法[12-24]。传统的检测方法存在操作繁琐、耗时长以及不易分辨结果等缺点。分子生物学检测技术的不断完善和发展， 克服了传统检测方法存在的问题， 为食源性病原微生物的检测提供了一种快速、灵敏、特异的方法，可作为一种可靠的检测方法。 电化学免疫传感器检测阪崎肠杆菌具有操作简单、响应快速、灵敏度高、不受样品颜色和浊度影响等优点，在食品、医学和环境等领域有很多研究和初步的应用。 张晓等[25]通过将硫堇(Thi)和辣根过氧化物酶标记的阪崎肠杆菌抗体依次自组装固定于多壁碳纳米管(MWCNT)/十二烷基苯磺酸钠(SDBS)修饰的四通道丝网印刷电极上，制成一次性免疫传感器，该方法检测阪崎肠杆菌的线性范围为102～108mL-1，检测限为5.7×101CFU/mL。

    以玻碳电极为基础电极， 以聚酰胺胺树枝状大分子材料结合还原性石墨烯纳米复合物为电活性修饰膜层，固定于玻碳电极表面，采用物理吸附法或牛血清白蛋白-戊二醛交联方法固定化辣根过氧化物酶标记的阪崎肠杆菌抗体制备纳米传感器，建立免疫传感器技术，用于快速测定婴幼儿奶粉中阪崎肠杆菌的残留量。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    磷酸二氢钠(分析纯)、磷酸氢二钠(分析纯)、氯化钾(分析纯)、过氧化氢(分析纯) ......