杨华青 赵 磊* 徐美利 王 鑫 连运河 王成涛

    (1 食品营养与人类健康北京高精尖创新中心 北京市食品添加剂工程技术研究中心北京工商大学 北京100048 2 晨光生物科技集团股份有限公司 河北邯郸057250)

    甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)属多年生菊科草本植物，原产于南美洲和巴西的高山草甸，特别是南美巴拉圭东北部[1]。甜叶菊中富含甜菊糖苷，被广泛用作天然甜味剂。有研究报道[2]从甜菊提取物中鉴定出89 种化合物，并将其分为多酚类化合物、萜类化合物、氨基酸衍生物、脂肪酸及其衍生物类、低聚糖、糖脂类、嘌呤和维甲酸等。这些化合物具有多种生物活性，如抗氧化[3]，抑菌[4]，抗肿瘤[5]等。甜菊提取物中的多酚和黄酮类化合物具有很强的体外清除自由基的能力[6]。然而，关于甜叶菊提取物体内抗氧化活性的研究鲜有报道。在生产甜菊糖苷的过程中会产生大量的絮凝废渣，其中含有大量的多酚类化合物，而这些副产物尚未得到充分利用。研究甜叶菊废渣提取物的抗氧化、抗衰老作用，对充分开发利用甜叶菊资源具有重要意义。

    本研究采用高效液相色谱法(HPLC)对两种甜叶菊废渣提取物中的主要成分进行定量分析，并测定其对D-半乳糖致衰老小鼠血清、肝脏和脑组织中一些重要的抗氧化指标(如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA))，以及脑组织中Nrf2 及其靶基因(SOD1，GPx1，HO-1)的mRNA 表达水平的影响等，探讨甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用，为其进一步开发和应用提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料

    两种甜叶菊废渣提取物，晨光生物科技集团股份有限公司。

    1.2 实验动物

    SPF 级昆明种雄性小鼠(33～37 g，SPF 级，8 周龄)，军事医学科学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK-(军)2012-0004。

    1.3 主要试剂

    D-半乳糖(分析纯级)，国药集团化学试剂有限公司；茶多酚(茶多酚>88%、EGCG>40%、儿茶素=0.76%)，成都华高生物制品有限公司；咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、槲皮素、槲皮苷(纯度均≧98%)，成都瑞芬斯生物科技有限公司；超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)、丙二醛(MDA) 测定试剂盒，南京建成生物工程研究所；BCA 法蛋白定量试剂盒、高纯总RNA 快速提取试剂盒(离心柱型) ......