李良玉 刘晚霞 李朝阳 牛广财*

    (1 黑龙江八一农垦大学 国家杂粮工程技术研究中心 黑龙江大庆163319 2 东北林业大学林学院 哈尔滨150040 3 黑龙江八一农垦大学食品学院 黑龙江大庆163319)

    抗性糊精是由淀粉加工而成的一种新型的水溶性膳食纤维，具有低黏度，低热量，难消化，稳定性良好等特性[1-3]，具有降低血糖，整理肠道，调节血脂，促进消化道益生菌生长繁殖等作用[4-7]，在食品加工中具有广阔的发展前景。很多专家学者、科研人员投身于抗性糊精的制备与纯化研究中[8-14]，然而由于各种原因均难以进行工业化生产。本研究采用国际上先进的模拟移动色谱技术纯化抗性糊精，旨在探索模拟移动色谱高效纯化抗性糊精的方法，为抗性糊精的产业化生产奠定基础。此外，由于不同淀粉的单糖组成、含量及连接方式不同，制备得到的抗性糊精的分子特性也不尽相同，以绿豆淀粉为原料，对纯化后的绿豆抗性糊精进行分子特性分析，为抗性糊精的分子合成机制、构效关系机制等研究奠定理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    绿豆淀粉原料，烟台双塔食品有限公司；强酸性阳离子凝胶型色谱树脂CSR-3K+，淄博东大化工股份有限公司；单糖标准品，美国Sigma-Aldrich公司。

    6890N/MSD5973 GC-MS 分析仪，美国Agilent 公司；高效尺寸排阻色谱-十八角激光光散射仪-示差折光检测器联用系统，美国Wyatt 公司；尺寸排阻色谱柱 (TSK G5000 PW 7.5 mm × 600 mm)，日本TOSOH 公司；RPL-ZD10 液相色谱分析型裝柱机，大连日普利科技仪器有限公司；制备色谱系统、顺序式模拟移动色谱分离实验设备(SSMB-6Z6L 型)，国家杂粮工程技术研究中心制造；1200s 液相色谱仪，美国安捷伦科技有限公司。

    1.2 试验方法

    1.2.1 绿豆抗性糊精制备方法 工艺流程：绿豆淀粉→烘干→酸处理→热解→冷却溶解→液化→糖化→脱色→脱盐→浓缩。

    称取一定量的淀粉烘干至含水量5%以下，喷雾加1%的盐酸，加酸量为体积分数7%，于干燥箱中90 ℃预干燥1 h，然后在160 ℃下热解2 h，热解结束后取出自然冷却。将热解产物加3 倍体积的水制成30%溶液，用1 mol/L NaOH 溶液调pH值为6.0，加入耐高温α-淀粉酶质量分数0.5%在95 ℃反应2 h，然后调pH 值至4.5，加质量分数0.6%糖化酶糖化2 h，反应结束后灭酶 ......