王 潇 欧雅文 李媛媛 胡小松 廖小军 张 燕

    (中国农业大学食品科学与营养工程学院 国家果蔬加工工程技术研究中心 北京100083)

    近年来，随着社会经济的发展和膳食结构的改变，过多的能量摄入使机体能量平衡遭到破坏，引发肥胖、胰岛素抵抗等问题[1]。为了优化膳食结构，避免高热量饮食带来的负面效应，国内外的膳食指南中都建议饮食多元化，将“深色蔬菜摄入”提到重要的位置，增加果蔬的多样性[2-3]。叶绿素作为自然界中最重要的光合色素，广泛存在于各种绿色蔬菜中，在减轻炎症，调节肠道功能方面具有保护作用[3-4]。在研究花色苷、多酚等物质的生物活性时，发现其能通过调节肠道菌群的组成显著缓解高脂饮食下的体重增加，并且随着肠道菌群研究的兴起，非营养物质成分的生物活性也逐渐被重视起来[5]。叶绿素作为绿色蔬菜中最普遍存在的非营养物质，其生物活性仍停留于早期探索，对其理解十分有限[6]。

    成人每天蔬菜的摄入量应达到300～500 g，其中1/3 或1/2 应为绿色或深绿色蔬菜。伴随着绿色蔬菜的摄入，其进入人体的量是可观的。究竟叶绿素进入人体以后会被人体怎样代谢，不得而知。Roca 等[7]培养小肠Caco-2 细胞，证明亲脂性叶绿素铜钠盐 (SCC) 衍生物能被小肠细胞吸收5%～10%，产生的细胞内吸收水平与类胡萝卜素相当，水溶性SCC 衍生物能被吸收45%～60%。虽然吸收量较高，但是在小肠Caco-2 细胞中保留时间较短。Fernández 等[8]将菠菜添加到商业级狗粮中喂养10 d，通过检测小狗外周血液中叶绿素衍生物水平，证明叶绿素衍生物被吸收的显著范围是2.5%～4.0%，平均3.4%，且试验发现叶绿素衍生物在动物体内具有低吸收，快速代谢等特点。目前有关叶绿素在体内代谢位点的研究较少。

    基于此，本试验从叶绿素进入动物体内的代谢入手，采用高效液相色谱法(HPLC)测定叶绿素及其衍生物在大鼠各消化器官的代谢情况，对大鼠血液、尿液及粪便中的叶绿素及其衍生物进行定量分析，同时采用16S rDNA 技术分析大鼠肠道微生物组成以及菌群多样性，并对菌群代谢的短链脂肪酸进行定量分析，探讨叶绿素在大鼠体内的生物活性作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    菠菜(Spinach)，购于中国农业大学东校区家属院果蔬市场。

    SPF 级SD 大鼠，8 周龄，雌、雄各半，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号SCXK(京)2012-0001。动物经3 d 适应性饲养，自由饮水饮食 ......