袁尔东 黄 敏 李 良 杨宜婷 任娇艳，3*

    (1 华南理工大学食品科学与工程学院 广州510641 2 无限极(中国)有限公司 广州510665 3 中新国际联合研究院 广州510006)

    猴头菇(Hericium erinaceus)又名猴头、猴头蘑、猴头菌、刺猬菌等，是一种大型真菌，属担子菌纲、多孔菌目、齿菌科、猴头属，因其子实体形状像猴子头部而得名。猴头菇含有丰富的蛋白质、脂肪、纤维素、多糖及多种氨基酸，子实体和菌丝体均可入药，性平味甘，具有助消化、利五脏的功能[1]。其中，猴头菇多糖是猴头菇的主要活性成分。它是由10 个以上的单糖以糖苷键连接而成的高分子多聚物，存在于菌丝、子实体和发酵液中，是目前研究最多的猴头菇活性成分之一。大量的医学和药理学研究表明，猴头菇多糖具有提高免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂等生理功能[2]。其中，关于猴头菇多糖对胃黏膜保护作用的研究较少。本文以猴头菇菌丝体/子实体粗多糖为原料，对其进行初步提纯，从细胞水平上研究其胃黏膜的保护作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    猴头菇子实体粗多糖、猴头菇菌丝体粗多糖，由无限极(中国)有限公司提供；吲哚美辛，Sigma公司；人胃黏膜上皮细胞(GES-1)，南方医科大学友情提供；DMEM 高糖培养基、胎牛血清(FBS)、双抗、胰酶Trypsin-EDTA、PBS，广州真知生物科技有限公司。

    1.2 主要仪器、设备

    UV754N 紫外分光光度计，上海仪电有限公司；H2050R 高速离心机，湘仪动力测试仪器有限公司；TDZ4-WS 低速自动平衡离心机，上海卢湘仪离心机仪器有限公司；SW-CJ-2FD 洁净工作台，苏州安泰空气技术有限公司；HERAcell150i CO2细胞培养箱，Thermo Scientific；THZ-82A 恒温振荡器，常州溪华仪器有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 猴头菇菌丝体/子实体多糖的提纯 将猴头菇菌丝体粗多糖及子实体粗多糖原料初步提纯，选择提取温度为70，80，90 ℃，提取时间1，2，3 h，料液比1∶10，1∶15，1∶20 进行单因素提取[3]。提取2 次，合并提取液，浓缩后以80%乙醇沉淀过夜、过滤、冷冻干燥，最后得到猴头菇菌丝体多糖和子实体多糖。

    1.3.2 多糖纯度的测定 参考张素斌等[4]的测定方法，稍作修改。准确吸取0.1 mg/mL 葡萄糖溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8 ......