石菲菲 王 丽 崔晓瑞 张卫东 刘小飞 李凌燕 潘 妍 宋洪波 李淑荣*

    (1 北京农业职业学院 北京102442 2 福建农林大学食品科学学院 福州350002 3 中国原子能科学研究院 北京102413)

    单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)为革兰氏阳性短杆菌，在自然界和各类食品中经常被发现，是一种人畜共患的食源性致病菌，感染该菌后可引起脑膜炎、急性胃肠炎、腹泻,甚至死亡等[1-3]。该菌具有较强的致病性，对各种应激条件(低温、高盐、低pH 等)有很强的耐受性，进一步增大了该菌的危害性[4]。英诺克李斯特菌(Listeria innocua)是另一种李斯特菌属，广泛存在于土壤和即食食品中[5]，对人类的致病性较小[6]。相关研究表明，英诺克李斯特菌与单增李斯特菌在血清、生理、形态方面有着高度的相似性，因此成为研究单增李斯特菌的良好替代模式菌[7]。

    辐照杀菌技术是一种冷杀菌技术，近年来被广泛应用于食品杀菌领域，与传统的高温杀菌方法相比，该方法可较好地保留食品中的热敏成分，且杀菌彻底，目前应用于食品中的辐照源主要有3 种，即γ 射线、X 射线和电子束射线[8]。相对于其它辐射源，电子束设备辐照效率高，可操作性强，对食品品质破坏较小，安全性较高[9]。许多研究表明，电子束辐照对食源性致病菌具有良好的杀菌效果[10-13]。

    傅里叶红外变换光谱技术作为一种综合检测细菌组分的有效方法，近年来得到广泛的应用，通过对细菌不同波数的红外吸收峰的分析，可以检测细菌在胁迫条件下胞内蛋白质、脂肪酸、碳水化合物、核酸和脂多糖等物质的变化情况[14-15]。实时荧光定量PCR(Real Time Fluorescence Quantitative，RT-qPCR) 技术是进行基因表达量测定较为简单、有效的方法[16]，具有光谱高敏感性以及定量精确等特点，可以对RT-qPCR 中荧光信号变化进行直接探测，从而得到定量结果，目前在生物学领域得到广泛的应用[17]。

    目前国内外关于辐照杀菌致死效果的研究已比较深入，而对于辐照杀菌的致死机理研究仍有待深入。本试验中采用傅里叶变换光谱技术检测李斯特菌在辐照后胞内物质的变化情况，利用RT-qPCR 技术检测电子束辐照对李斯特菌DNA损伤修复、糖代谢以及毒力因子相关基因表达量的影响，以期从分子水平阐释电子束辐照对李斯特菌的致死机理，为电子束辐照应用于食品杀菌提供一定的理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    英诺克李斯特菌(Listeria innocua)1.2990 ......