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编号:39846
藻蓝色素蛋白诱导非小细胞肺癌H1299细胞凋亡的机制
http://www.100md.com 2021年1月15日 2020年第12期
调控,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1藻蓝蛋白促进非小细胞肺癌H1299细胞凋亡,2藻蓝蛋白处理H1299细胞后的转录组分析结果,3差异基因TIRAP的转录和蛋白水平验证
     郝 帅,李前程,李 爽,刘媛璞,王 静,王成涛

    (北京市食品营养与人类健康高精尖创新中心 北京市食品添加剂工程技术研究中心北京工商大学食品与健康学院 北京100048)

    肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一[1],具有很高的发病率和致死率[2]。其中,作为肺癌的一种亚型,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发病率高达85%[3],严重危害人类健康。不仅如此,非小细胞肺癌还具有较高的浸润能力和术后复发率。对于非小细胞肺癌的治疗仍然面临许多挑战。

    藻蓝色素蛋白(C-Phycocyanin,C-PC)是一种源于螺旋藻、蓝藻细胞中的捕光蛋白,在藻体细胞内以六聚体的结构存在[4],吸收光谱为615~640 nm[5]。在GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中,藻蓝被列为我国允许使用的天然食品着色剂,可用于饮料、糕点、糖果等食品生产中。除了能作为食用色素广泛用于食品行业,藻蓝色素蛋白同时具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生理功能[6]。目前,有报道证实藻蓝蛋白对包含肺癌在内的多种肿瘤细胞系具有促进凋亡,抑制增殖迁移的作用[7-11]。例如,Pardhasaradhi 等[8]发现藻蓝蛋白对组织细胞瘤AK-5 细胞具有较强的抑制作用;Subhashini 等[9]发现藻蓝蛋白能够促进慢性白血病细胞K562 的凋亡;Liao 等[10]则通过研究证实了藻蓝蛋白对胰腺癌细胞的体内外抑制效应。纵观目前的研究现状,大量的研究表明藻蓝蛋白具有非常优良的肿瘤抑制作用,而对于其中调控机制的报道还非常少。鉴于藻蓝蛋白所具有的天然、安全、抗肿瘤等优良特性,深度研究其抗癌调控机制具有重要意义,可为非小细胞肺癌的治疗提供新思路。

    本实验室前期研究证实藻蓝蛋白对非小细胞肺癌H1299 细胞具有促凋亡、抑增殖的作用[7],具体的调控机制尚不明确。为了探究藻蓝蛋白在非小细胞肺癌中的调控机理,本文以高通量检测技术为手段,对藻蓝蛋白处理过的H1299 细胞进行转录组分析,筛选潜在的调控靶点,检测细胞凋亡和增殖能力。本研究结果为深入揭示藻蓝蛋白在非小细胞肺癌中的作用机制,以及为功能性食用色素的抗肿瘤治疗提供了新的理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    人类非小细胞肺癌NCI-H1299 细胞系(以下简称H1299 细胞系)由本实验室(北京市食品添加剂工程技术研究中心)保存;藻蓝蛋白标准品由内蒙古农业大学惠赠。

    转染试剂Lipofectamine3000 ......

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