刘佳伊，吕欣然，李 婧，白凤翎*，董 君，励建荣

    (1 渤海大学食品科学与工程学院 辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心 辽宁锦州121013 2 宁夏出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心 银川750000)

    乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)是一类能够发酵糖类产生以乳酸为主要产物的无芽孢革兰氏阳性细菌。乳酸菌栖息在传统发酵蔬菜、肉制品、乳制品、动物肠道、饲料等各种自然生态环境中，形成优势乳酸菌后对其它微生物类群具有较强的拮抗作用。乳酸菌主要通过产生有机酸、乳酸菌素、罗伊菌素、过氧化氢等代谢产物抑制其它微生物的生长繁殖[1-2]。乳酸菌种类的多样性决定了其拮抗机制的复杂性，主要包括乳酸菌的代谢产物攻击受试对象的细胞膜，干扰受试菌的细胞代谢活性，抑制蛋白质的合成等途径[3-6]。

    目前，乳酸菌素Nisin 的抑菌机制的研究较清晰，Nisin 的抑制对象主要是革兰氏阳性菌，其可吸附在受试菌细胞壁合成的前体物质——脂质(lipid)II 上，进而抑制细胞壁的合成。此外，Nisin可插入受试菌的细胞膜上，导致孔的形成，打破细胞膜内、外原有的离子梯度平衡，从而使细胞内的氨基酸、K+、ATP 等物质外泄[7]。Avitabile 等[8]利用圆二色光谱技术(Circular dichroism，CD)发现蛙皮素和天蚕素A 两种抗菌肽通过与指示菌膜上的LPS 结合实现对大肠杆菌的抑制作用；Gupta 等[9-10]发现从面糊中分离的海氏肠球菌(Enterococcus hirae)形成的肠球菌素LD3 能够使沙门氏菌、志贺氏菌等受体细胞形成孔洞，促使ATP 外泄和质子电动势损耗，导致受试菌死亡；Zhao 等[11]发现从酸菜中筛选出的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)JLA-9 通过抑制菌体细胞氧化呼吸代谢活动来阻碍蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的生长。但关于乳酸菌素抑制革兰氏阴性菌的作用机制还未完全阐述清楚，需要进一步的探究。

    本文以产细菌素DL3 的植物乳杆菌DL3 为应试菌，腐败希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)为受试菌，从生长曲线、细胞膜通透性、紫外吸收物质、细胞形态特征和蛋白质合成等指标探究植物乳杆菌DL3 对腐败希瓦氏菌的抑菌机理，以期为开发新的水产品生物防腐剂奠定理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 样品与菌株 应试菌：植物乳杆菌DL3 ......