降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定与益生特性评价
胆盐,耐受性,1材料和方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,4数据统计分析,2结果与分析,1高效降胆固醇菌株的筛选结果,2菌株的鉴定,3酸耐受性结果,4胆盐耐受性结果,5抗生素敏感性,6抗菌活性,3讨论,4结论
郑志瑶,王伟军,陈 波,刘建新,任大喜*(1 浙江大学动物科学学院奶业科学研究所 杭州310058 2 浙江一鸣食品股份有限公司 浙江温州325000)
根据WHO 统计,心血管疾病(CVD)是目前全球人口的主要死因之一,每年造成1 700 多万人死亡[1]。近年来国内外大量临床和动物研究表明,服用乳酸菌,特别是乳杆菌及其相关制品具有减少血清胆固醇含量,降低心血管疾病发病率的功效[2-3]。乳酸菌(LAB)在自然界中广泛存在,是发酵工业中不可缺少的微生物。诸多研究也报道了其作为益生菌对人体健康的促进作用,包括:免疫调节、减轻乳糖不耐受、预防结肠癌和减少过敏反应[4-6]。1974年,Mann 等[7]最早发现乳酸菌具有降低人体血清胆固醇的潜力,这引起国内外研究人员对乳酸菌及乳制品在防治CVD 方面的关注。植物乳杆菌299v[8]能显著降低高胆固醇血症患者血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。肖琳琳等[9]用菌株KM-166 灌胃高脂血症小鼠,显著降低了血清中总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平。Wang 等[10]分离到1 株植物乳杆菌LIP-1,体外降胆固醇能力为71.47 μg/mL,同时能显著降低大鼠血清TC 和LDL-C 水平。
益生菌(Probiotic)是一类在宿主体内以一定数量存活并发挥有益作用的微生物。人体内胃肠道中的酸和胆盐环境能抑制微生物的生长,潜在的益生菌应具有酸和胆汁的耐受性,这是菌株在小肠中生存及发挥益生作用不可或缺的因素[11]。微生物的抗生素敏感性测定对评价菌株安全性具有重要意义。只有不具备耐药性的菌株用于人体才是安全的。此外,部分乳酸菌在生长过程中产生的代谢物,能抑杀肠道中的致病菌,调节肠道菌群平衡。对于体外筛选降胆固醇乳酸菌来说,对菌株的益生特性评价是不可缺少的环节。只有具备了益生菌最基本条件的菌株,才能开展体内研究。
本研究中在体外筛选高效降胆固醇的乳酸菌,对其酸耐受性、胆盐耐受性、抗生素敏感性及代谢产物的抗菌活性进行评估,为后续体内研究及功能性乳制品开发提供具有益生潜力的菌株。
1 材料和方法
1.1 材料与试剂
样品来源:从吉林延边朝鲜族自治州农户采集了8 个传统发酵泡菜样本;浙江金华地区金华火腿食品厂采集了4 个火腿样品;婴儿粪便采集自浙江杭州20 个未满1 岁的母乳喂养的健康婴儿。
阳性对照菌株:嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)ATCC 43121,购自美国典型培养物保藏中心 ......
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