糜唯钰，段 诺，吴世嘉，姬 华，王周平

    (石河子大学食品学院 新疆石河子832003)

    β-苯乙胺是一种重要的芳香族生物胺，作为中枢神经系统中神经递质的调节剂，存在于哺乳动物组织中，高浓度的β-苯乙胺会导致β-内啡肽释放，诱导产生去甲肾上腺素，从而引发高血压和偏头痛等症状[1]。在奶酪、巧克力和腌制肉等食品中都存在β-苯乙胺。其潜在的毒性和作为食品质量标记的可能性，有必要对食品中的β-苯乙胺进行检测。对β-苯乙胺检测技术的研究在国内外已经开展多年，目前已建立多种检测方法，其中最主要的是基于分离技术的仪器分析法，例如高效液相色谱(HPLC)[2-5]，气相色谱(GC)[6-9]和毛细管电泳(CE)[10-12]等。这些方法可对β-苯乙胺进行精确的定量分析，然而也受到一些因素的限制，如仪器价格昂贵，检测耗时较长以及需要专门技术人员操作等。

    核酸适配体(Aptamer)是通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment，SELEX)，筛选获得的一种单链寡核苷酸(ssDNA 或RNA)，可折叠形成三级结构，该结构可特异性识别并结合靶标。核酸适配体不仅具有与抗体相似的亲和力和特异性，而且还具有其它优点，例如更短的合成时间，更低的制造成本，更少的批次间差异性，更高的可修饰性，更好的热稳定性以及更广泛的目标种类[13-15]。基于此，核酸适配体被广泛用于临床诊断和治疗剂[16-18]，食品安全检测[19-21]和环境监测[22-24]等众多领域。

    小分子靶标适配体的筛选大都采用在固相材料表面固定靶标分子的SELEX 技术，该技术存在固定操作复杂，固相材料的空间位阻和靶标分子构象可能改变等缺点。基于固定ssDNA 文库的捕获SELEX(Capture-SELEX)无需固定靶标分子，避免了上述问题，更适用于可溶性小分子靶标核酸适配体的筛选[25-27]。Capture-SELEX 技术通过特别设计的一段生物素化的反义寡核苷酸链，与核酸适配体筛选文库固定区域的一端互补结合，从而将ssDNA 文库固定在抗生物素蛋白包被的磁珠表面。筛选过程中，能够与靶标形成复合物的适配体从磁珠表面解离，通过收集上清，PCR 扩增，制备单链等步骤[28-30]，获得下一轮筛选的次级文库。经多轮筛选，就可获得对靶标具有高亲和力和特异性的适配体。

    迄今为止，特异性结合β-苯乙胺的ssDNA 适配体尚无报道。本研究通过Capture-SELEX 技术筛选对β-苯乙胺具有高亲和力和特异性的ssDNA 适配体 ......