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编号:39711
牛初乳中抗高血压因子对成年大鼠心肌细胞电压依懒性钙通道的影响
http://www.100md.com 2021年4月22日 2021年第3期
波长,1试验材料,1试验药物,2实验动物,3试剂及仪器,2试验方法,1成年大鼠心肌细胞分离15,2Fura-2,AM负载,3荧光测定和心肌Ca2+i的计算17,3试验结果,1成年大鼠心肌细胞形态学观
     滕 刚,任皓威,赵添玉,商佳琦,刘 宁

    (东北农业大学食品学院 乳品科学教育部重点实验室 哈尔滨150030)

    牛初乳是从正常分娩后3 d 的奶牛体内分泌出来的乳汁。牛初乳中富含多种营养成分,各种免疫刺激及生长因子,其在动物以及人类健康管理中的作用受到社会各界的广泛关注[1-2]。

    有研究发现,牛初乳的营养成分和免疫组成与常规牛乳大不相同。在乳汁生成和哺乳期之前,成纤维细胞就进行初乳分泌[3-5]。牛乳和初乳被认为是重要的天然生物活性成分的来源。牛乳获得的多肽具有多种生物学功能,其主要功能之一就是抗高血压[6]。高血压是困扰全球各国的严重问题,它是引起心脑血管疾病以及肾脏发病机率和死亡率的重要原因之一。研究人员对于牛乳及牛初乳的抗高血压作用机制及效果开展了广泛研究,例如干酪来源的肽可以使自发性高血压大鼠收缩压降低7.1~29.3 mmHg,脱脂发酵乳使志愿者的收缩压降低4.6~14.1 mmHg,不同食物来源的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽也具有降低血压的作用[7-13]。

    牛初乳中含有一些低分子质量肽类的降血压活性物质,研究表明,可运用超滤、离子交换层析及凝胶过滤层析等技术对牛初乳中抗高血压因子(antihypertensive factor in bovine colostrums,AFBC)进行分离纯化,结果显示,AFBC 能够降低原发性高血压大鼠的血压,且对正常血压的Wistar 大鼠没有影响[13]。为了进一步探究AFBC 的降血压机理,本试验采用Fura-2/AM 钙荧光指示剂对急性分离成年大鼠的心肌细胞染色,应用荧光分光光度计测定AFBC 与钙离子通道阻断剂--维拉帕米(Ver)对成年大鼠心肌细胞钙浓度的作用机制。

    目前,国内外对乳源降血压肽的作用机理研究主要集中于动物体内降血压作用以及对血管紧张素转换酶抑制作用,尚无文献报道阻断钙离子通道,抑制心肌细胞钙内流的机理研究,本研究也为乳源降血压肽的作用机理研究提供了新思路。

    1 试验材料

    1.1 试验药物

    按照文献[13-14]方法分离纯化牛初乳中抗高血压因子(AFBC),试验之前用生理盐水配制成所需浓度;用维拉帕米(Ver)进行注射,试验所用的Ver 购于上海禾丰制药有限公司。

    1.2 实验动物

    选取体重在200~250 g 之间的Wistar 大鼠 ......

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