袁慕云，许龙岩*，柯碧霞，陈 瑶

    (1 广州海关技术中心 广州510623 2 广东省疾病预防控制中心 广州510440 3 南方医科大学 广州510515)

    致泻大肠埃希氏菌(diarrheagenic Escherichia coli，DEC)，可通过污染食物引起人类发病，主要包括肠道致病性大肠埃希氏菌(enteropathogenic Escherichia coli，EPEC)、产肠毒素大肠埃希氏菌(enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC)、产志贺毒素大肠埃希氏菌 (Shiga toxin-producing Escherichia coli，STEC)、肠道侵袭性大肠埃希氏菌(enteroinvasive Escherichia coli，EIEC)、肠道集聚性大肠埃希氏菌 (enteroaggregative Escherichia coli，EAEC)[1-4]。随着对DEC 致病机制认识的深入和分子生物学技术的发展，采用普通PCR 或荧光PCR 方法检测DEC 越来越受到认可并广泛应用，而普通PCR 方法产物需要通过电泳进行观察，操作繁琐，而且部分目的片段大小差异在20 bp 左右，用琼脂糖电泳难以区分[5-9]。朱林英等[10]根据DEC 的8 种毒力基因设计引物，检测1 658 份粪便样品。陈爱萍等[11]根据DEC 部分基因用荧光PCR 检测DEC。胡安妥等[12]根据11 种毒力基因建立两组多重荧光PCR 扩增体系检测DEC，然而，不能区分扩增的志贺毒素基因是Stx1 和Stx2 中的哪一种，而且均未系统分析扩增体系的扩增效率、线性相关系数R2等荧光PCR 关键参数。本研究根据bfpB(bundle-forming pilus B，束状菌毛B基因)、eaeA (gene encoding intimin for Escherichia coli attaching and effacing，紧密素基因)、LT(heat-labile enterotoxin，热不稳定性肠毒素基因)、ST(heat-stable enterotoxin，热稳定性肠毒素基因)、Stx1(Shiga toxin one，志贺毒素Ⅰ基因)、Stx2(Shiga toxin two，志贺毒素Ⅱ基因)、ipaH(invasive plasmid antigen H-gene，侵袭性质粒抗原H 基因)和aggR(aggregative adhesive fimbriae regulator 集聚黏附菌毛调节基因)设计引物和探针 ......