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编号:39658
环境条件对温和气单胞菌群体感应基因luxI/luxR表达的影响
http://www.100md.com 2021年5月15日 2021年第4期
氮源,碳源,1材料与方法,1试验菌株及培养条件,2主要试剂与仪器,3方法,4不同环境因素对温和气单胞菌luxI,luxR基因表达情况的影响,5数据分析,2结果与分析,1温和气单胞菌群体感应luxI
     孙晓佳,李婷婷,赫彬彬,梅永超,谢 晶,励建荣*

    (1 渤海大学食品科学与工程学院 生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省食品安全重点实验室 辽宁省高等学校生鲜食品产业技术研究院 辽宁锦州121013 2 大连民族大学生命科学学院 辽宁大连116600 3 上海海洋大学食品学院 上海201306)

    群体感应(Quorum sensing,QS)是细菌细胞间通过分泌信号分子(Autoinducer,AI)进行相互交流的一种通讯机制,当信号分子浓度达到特定阈值时,细胞会启动特定基因的表达,以适应环境的变化,进而调控细菌的生物行为,包括生物发光、生物被膜形成及毒力因子表达等[1-3]。其中,革兰氏阴性菌的QS 调控系统为luxI/R 型,所分泌的信号分子为N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)[4]。微生物的生长代谢是引起水产品腐败的主要原因,其QS 系统在水产品的腐败过程中起着至关重要的作用。研究表明,微生物许多特性的表达受温度、pH 值、营养基质等外界环境因素的影响[5]。外界环境的改变、营养基质的差异都可能影响微生物的QS 系统及其致腐能力。食源性假单胞菌具有较强的分泌信号分子的能力,然而,不同温度和碳源条件下分泌的信号分子种类和产量明显不同[6]。孔西曼等[7]发现蜂房哈夫尼菌在不同碳源或氮源培养条件下分泌AHLs 的能力具有显著差异,分别以果糖、硫酸铵为碳源和氮源时AHLs 的分泌量最高。

    温和气单胞菌(Aeromonas sobria),又称维隆气单胞菌温和生物型(A.veronii biovar sobria),属于弧菌科、气单胞菌属,广泛存在于植物、动物以及海洋环境中[8]。作为鱼类等水产品中常见的特定腐败菌之一,其毒力因子的产生和生物被膜的形成引起严重的食品安全问题,给水产养殖业带来巨大的经济损失[9-11]。本实验室工作人员从腐败大菱鲆中分离得到1 株温和气单胞菌,发现不同培养条件显著影响其分泌AHLs 的能力[12-13]。此外,有研究表明不同温度条件下蜂房哈夫尼亚菌中QS 调控基因luxI、luxR 的表达量明显不同,低温条件(10 ℃)下其表达量最高,而高于最适温度(28 ℃)时表达量降低[14]。温和气单胞菌在水产品贮藏过程中可能受到各种环境胁迫,如温度、渗透压、pH 值和营养基质的改变。然而,目前关于不同环境条件对温和气单胞菌群体感应系统表达的影响研究较少。

    本文通过实时荧光定量PCR 技术检测不同环境条件下(温度、pH 值、NaCl 浓度、碳源、氮源)大菱鲆源温和气单胞菌luxI/luxR 基因(NCBI Reference Sequence:WP_101529659.1;WP_00 5335753.1)的表达情况 ......

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