黄巾凌，孟令缘，盛焕精，崔生辉，闫韶飞，李凤琴，杨保伟*

    (1 西北农林科技大学食品科学与工程学院 陕西杨凌712100 2 中国食品药品检定研究院 北京102629 3 国家食品安全风险评估中心 北京100022)

    沙门氏菌可引起食物中毒，导致肠胃炎、伤寒及副伤寒，是一类重要的食源性致病菌，在公共卫生学上具有十分重要的意义。目前，抗生素仍然是对付包括沙门氏菌在内诸多病原菌的首选。然而，随着抗生素的广泛使用，沙门氏菌的耐药问题日趋严重，给人类和动物健康带来极大威胁[1-3]。长期以来，大量学者以及政府部门对食源性沙门氏菌的药敏性、耐药菌株携带的编码基因做了广泛的调查和监测[4-6]，然而仍缺乏在耐药基因检测中用作参比的标准样品。为了更好、更快、更精准地了解介导食源性致病菌携带的耐药基因和相关耐药机制，检测过程标准菌株的使用非常必要。

    参考物质(Reference material，RM)是一种已经确定具有1 个或多个特性值的物质或材料，各国管理机构对参考物质的定义和要求表述各有不同。作为高度均匀、良好稳定和量值准确的测量标准，参考物质具有复现、保存和传递量值的基本功能。微生物标准物质是食品类标准物质中特殊的一类，我国微生物标准物质的研制起步较晚，能用于检验检测机构的相关标准物质较少[7-8]。目前已研制出的微生物标准物质主要应用于食源性致病菌的鉴定、病毒和转基因成分检测[9-10]，而关于介导相关耐药机制的耐药基因检测用微生物标准物质的研制，仍处于空白，急需开展此类标准物质的研究，以保证食源性致病菌携带的耐药基因检测结果的准确性。

    本研究遵循参考菌株研制规范，对前期研究中得到的部分菌株采用多种方法鉴定和研究，以期为参考菌株的制备提供菌株材料。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 118 株沙门氏菌分别于2008、2010、2011、2012年和2013年采集自广东、北京、福建、上海、陕西、河南和四川等地农贸市场和超市的零售食品及医院的临床生物样品(人粪)。沙门氏菌标准菌株(Salmonella Typhimurium)LT2、药敏性测定用质控菌株大肠杆菌 (Escherichia coli)ATCC25922、大肠杆菌(Escherichia coli)ATCC35218 和粪肠球菌 (Enterococcus faecalis)ATCC29212 均为中国药品生物制品检定研究院惠赠。

    1.1.2 培养基 LB 琼脂培养基、MHA 培养基 ......