高产胞外多糖嗜热链球菌的筛选及胞外多糖的结构分析
残基,半乳糖,去离子水,1材料与方法,1材料与试剂,2方法,2结果与分析,1高产胞外多糖嗜热链球菌的筛选,2DEAE-Cellulose52离子交换色谱分级纯化结果,3SepharoseCL-6B凝胶柱层析纯化
陈海燕,李嘉雯,李 婷,刘 洋,田佳乐,丹 彤(内蒙古农业大学 乳品生物技术与工程教育部重点实验室 农业农村部奶制品加工重点实验室 呼和浩特010018)
乳酸菌胞外多糖(Lactic acid bacteria extracellular polysaccharide,LAB EPS) 是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外,常渗于培养基的一类水溶性多糖[1],属于微生物胞外多糖的一种。其可以作为细胞结合的多糖附着在菌体表面,称为荚膜多糖(Capsular polysaccharide,CPS),或者作为释放的胞外多糖分泌到周围的培养基中形成黏液,即称为黏液多糖(Slimpolysaccharide,SPS)[2]。迄今为止报道的大多数产生EPS 的菌株产生SPS,而一些LAB 菌株可以同时产生CPS 和SPS[3-4]。
目前,虽有很多关于动物、植物和真菌多糖的研究报道[5-8],但来自嗜热链球菌的EPS 特别受到关注,主要因为它们 “普遍被认为是安全的”(GRAS)菌株和它们对人类的有益影响[9-10]。嗜热链球菌能够改善原料的风味、香气、质地和安全性,更重要的是其代谢产物中EPS 具有的特殊生理功能,如抗肿瘤,抗氧化、免疫刺激活性[11-13]以及作为增稠剂代替非食品级生物(黄原胶、结冷胶、支链淀粉等)的潜在用途,而使其广泛应用于各个领域[14]。EPS 类型多样,结构复杂,不仅决定自身的溶解度、分布、支化度和链构象等物理性质,还是研究其构效关系和结构修饰的基础。
当前,关于LAB EPS 的分离、提取及结构分析成为研究热点。本研究从传统发酵乳制品分离得到的442 株嗜热链球菌中筛选的1 株高产EPS嗜热链球菌MGD1-4 为研究对象,通过乙醇沉淀、DEAE-52 纤维素离子交换柱层析、Sepharose CL-6B 分子筛层析、高效液相色谱(High performance liquid chromatography,HPLC)、红外光谱(Infrared spectrum,IR)及核磁共振(Nuclear magnetic resonance,NMR)等方法对菌株所产EPS 进行分离、纯化和结构分析,探明其分子结构及理化性质,为深入解析EPS 结构与功能关系打下基础,为乳酸菌资源开发提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 菌种 嗜热链球菌 (Streptococcus thermophilus)MGD1-4,由本实验室提供 ......
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