海产品中蜂房哈夫尼菌的鉴定及相关特性研究
腐败,菌株,1材料和方法,1试验菌株及培养条件,2试剂和仪器,3细菌的分离,4蜂房哈夫尼菌特性研究,2结果与分析,116SrRNA菌株鉴定结果,2生理生化鉴定结果,3蜂房哈夫尼菌特性研究,3讨论
朱耀磊,曲继发,桑 雪,张公亮,毕景然,郝洪顺,侯红漫*(1 大连工业大学食品学院 辽宁大连116034 2 辽宁省水产品加工质量安全与控制重点实验室 辽宁大连116034)
蜂房哈夫尼(Hafnia alvei)是革兰阴性、运动、有鞭毛的兼性厌氧杆菌,可在培养基上生长,菌落一般为灰白色,呈圆形,有轻微的不规则边缘。蜂房哈夫尼生存范围广泛,存在于人和动物的粪便、河流、海洋和土壤中,在特定条件下,可引起人类多种肠道感染疾病,通常被认为是一种条件致病菌[1-2]。
蜂房哈夫尼是真空包装、气调包装食品中一种常见的优势腐败菌,常常造成富含蛋白质的水产品、肉制品、乳制品在低温冷藏时发生腐败变质。研究发现,在真空包装的红肉和白肉制品中,哈夫尼菌属为优势腐败菌的几率高于76%[3]。在真空包装的肉制品中,蜂房哈夫尼菌和沙雷氏菌为主要的腐败肠杆菌[4]。气调包装(MAP)的鲑鱼肉低温冷藏时,优势腐败菌为蜂房哈夫尼菌[5]。南亚、东南亚地区流行的真空包装鱼糜制品中蜂房哈夫尼菌为主要致腐微生物[1]。超高温灭菌乳在7 ℃冷藏条件下,蜂房哈夫尼菌的生长速度及腐败贡献要高于荧光假单胞菌[6]。
目前关于蜂房哈夫尼菌的报道不多。本课题组一直从事海产品安全的研究,发现蜂房哈夫尼可在含盐5%的培养基中正常生长,在海产品原料及产品中较为常见,在海产品的腐败,尤其是生物胺产生方面贡献突出。本课题组从虾酱中分离出3 株(G1、G4 和G5)、从鱼露中分离出1 株(Y1)、从即食海参中分离出1 株(H4)蜂房哈夫尼菌。通过研究海产品中蜂房哈夫尼菌相关特性,进一步明确该菌的致腐特性,更有针对性的控制该菌在海产品安全方面的危害作用。
1 材料和方法
1.1 试验菌株及培养条件
菌种来源:分离自虾酱(辽宁,盘锦)中的G1、G4、G5 菌株;分离自鱼露(山东,威海)中的Y1 菌株;分离自腐败即食海参的蜂房哈夫尼菌(H.alvei H4)H4 菌株;分离自腐败大菱鲆的蜂房哈夫尼菌HA-01 由大连民族大学李婷婷副教授馈赠。上述菌株均使用LB 培养基,在30 ℃条件下培养。
1.2 试剂和仪器
结晶紫染液,上海生工生物;各类抗生素,索莱宝试剂有限公司;细菌基因组DNA 提取试剂盒,北京天根生化科技有限公司;ExTaq DNA 聚合酶,大连Takara;各类培养基,北京奥博星生物技术有限公司;赖氨酸盐酸盐、鸟氨酸盐酸盐、组氨酸盐酸盐、酪氨酸盐酸盐、色氨酸盐酸盐和盐酸吡哆醛 ......
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