传统虾酱中酵母菌分离鉴定及碳源利用特性
1材料与方法,1样品采集,2培养基与试剂,3仪器与设备,4方法,2结果与分析,1虾酱中酵母菌的分离与鉴定,2酵母菌DNA提取及26SrDNAPCR扩增结果,3结论
徐文欢,吴若菡,李采婵,吕 静,纪超凡,梁会朋,孙泽平,林心萍(大连工业大学食品学院 国家海洋食品工程技术研究中心 辽宁大连116034)
“虾酱”是中国沿海地区及东南亚地区人们常用的调味料之一,是以毛虾等小型虾类经腌制、捣碎、发酵制成的糊状食品[1],其滋味鲜美,回味无穷,具有独特的风味。我国的虾酱生产主要集中在沿海地区,如辽宁、山东、天津、江苏、广东、海南等[2]。
虾酱的发酵是一个较为复杂的化学变化过程,传统的虾酱生产通常采用自然发酵,且发酵过程受到季节、天气、温度等诸多不可控因素影响,使虾酱的生产周期长,品质不稳定,不利于大规模工业化生产。国内外专家、学者对不同地区的虾酱发酵工艺及品质进行研究。如:吴帅等[3]研究了低值虾酱发酵中的风味变化;苑宁等[4]阐述了虾酱生产过程中的品质变化,以及容易引起食品安全问题的不良因素。还有一部分学者对虾酱中的微生物进行分离,例如:石敏等[5]从侗族传统虾酱分离获得一些具有蛋白酶、脂肪酶以及其它酶类的活性乳酸菌;孙业盈等[6]从蜢子虾酱中分离鉴定出1株中度嗜盐菌MKY2;连鑫等[7-8]从李锦记公司提供的广东传统发酵虾酱中分离鉴定出产香酵母和产蛋白酶霉菌;吕欣然等[9]在锦州传统虾酱中分离出蛋白酶嗜盐菌。大连因处于黄、渤海交界海域这一独特的地理位置,故造就了大连传统虾酱与众不同的风味和口感,这与其自身特有微生物环境有着密切联系。过去对传统虾酱中酵母菌多样性及特性的研究甚少,也鲜有对酵母菌碳源同化利用特性的研究。
本研究通过对大连虾酱中酵母菌的分离纯化,采用26S rDNA 菌株进行种属鉴定,对所分离的酵母进行碳源同化特性研究,所得结果对虾酱发酵优良菌株的筛选以及工艺优化有重要意义。
1 材料与方法
1.1 样品采集
样品虾酱,大连竹岛食品公司的生制虾头酱。
1.2 培养基与试剂
YEPD 培养基:葡萄糖20 g/L,蛋白胨10 g/L,酵母10 g/L,pH 6.0,121 ℃灭菌20 min。
碳源同化培养基:硫酸铵5 g/L,磷酸二氢钾1 g/L,七水硫酸镁0.5 g/L,酵母粉0.5 g/L,琼脂粉15 g/L,碳源(葡萄糖、甘油、乳糖、蔗糖、柠檬酸、壳聚糖、甘露醇、山梨糖醇、N-乙酰-D-氨基葡萄糖)20 g/L,pH 5.8~6.0,121 ℃灭菌20 min。
甘露醇(分析纯)、壳聚糖(分析纯)、甘油(分析纯),天津市光复精细化工研究所;N-乙酰-D-氨基葡萄糖 ......
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