方 磊，张瑞雪，陈 亮，张海欣，贾福怀，晏永球，谷瑞增，魏 颖*

    (1 中国食品发酵工业研究院 北京市蛋白功能肽工程技术研究中心 北京100015 2 宁波御坊堂生物科技有限公司 浙江宁波315012)

    随着生活水平的提高，男性生殖健康的问题也越来越引起人们的关注[1]。牡蛎属于软体动物门、瓣鳃纲、异柱目、牡蛎科，是世界第一大养殖贝类，也是我国四大养殖贝类之一。研究发现，牡蛎不仅含有丰富的糖原、蛋白质、人体必需的8 种氨基酸以及维生素，还富含锌、硒、铁、铜、碘等微量元素，尤其是含有丰富的牛磺酸[2-3]。《本草纲目》记载：牡蛎肉“多食之，能细括皮肤，补肾壮阳，并能治虚，解丹毒”。牡蛎中含有非常丰富的锌元素和精氨酸，锌元素能够维持男性生殖健康，而且还能有效改善前列腺肥大等男性疾病；精氨酸是精子合成的必需成分，常吃富含精氨酸的食品有助于补肾益精。食源性低聚肽是目前研究的热点方向，而牡蛎肽就是其中最为重要的一种。牡蛎肽的生产技术成熟，且其分子质量、氨基酸等成分明确。目前关于牡蛎促进男性性功能方面的研究内容较少。本文以牡蛎全粉、牡蛎肽为研究对象，体外培养小鼠睾丸间质细胞(TM3)，研究其对TM3 细胞合成和分泌睾酮、二氢睾酮、NO、SOD 酶活及cGMP 等影响，为开发利用牡蛎奠定基础，也为其应用于相应保健食品提供理论支持。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    正常小鼠睾丸间质细胞(TM3 细胞)，中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心；DMEM/F12(1∶1)培养基，美国GIBCO 公司；胎牛血清，杭州四季青公司；NO 测定试剂盒、SOD 测定试剂盒、睾酮测定试剂盒、二氢睾酮测定试剂盒、cGMP 测定试剂盒，美国Enzo 公司；西地那非，美国Sigma公司。

    1.2 仪器与设备

    BX53 型倒置显微镜，日本奥林巴斯公司；细胞培养箱，美国Thermo 公司；SpectraMaxR iD5 型多功能酶标仪，美国Molecular Devices 公司；Accuri C6 型流式细胞仪，美国BD 生物科学仪器及软件公司；L-8900日立全自动氨基酸分析仪，天美(中国)科学仪器有限公司；3K-15 型冷冻离心机，德国Sigma 公司。

    1.3 试验方法

    1.3.1 牡蛎全粉、牡蛎肽的制备

    1)牡蛎全粉的制备 牡蛎全粉按以下工艺流程制备：牡蛎肉-匀浆-酶解-陶瓷膜过滤-浓缩-活性炭过滤-喷雾干燥-牡蛎全粉。

    2)牡蛎肽的制备 牡蛎肽按以下工艺流程制备：牡蛎肉-匀浆-水洗-酶解-陶瓷膜过滤-浓缩-活性炭过滤-喷雾干燥-牡蛎肽 ......