宋恭帅，戴志远，2*，沈 清，2，崔益玮，朱蓓薇，王加斌，郑平安

    (1 浙江工商大学海洋食品研究院 杭州310012 2 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室 杭州310012 3 大连工业大学食品学院 辽宁大连116034 4 海力生集团有限公司 浙江舟山316021)

    鲨鱼肝油是烷基甘油、角鲨烯等生物活性物质的重要来源，具有良好的生理保健功能[1]。烷基甘油是一种醚脂质化合物，根据甘油骨架上连接的烷烃链饱和度与长度的不同，主要分为鲨肝醇(十八烷氧基甘油)、鲨油醇(十八一烯烷氧基甘油)、鲛肝醇(十六烷氧基甘油)等[2]。其中，鲨肝醇是烷基甘油重要的组成部分，具有对抗因细胞毒类药物或苯中毒引起的造血系统抑制，抗癌、防癌，促进白细胞增生及抗放射线等作用，是重要的免疫刺激因子[3-4]。目前鲨肝醇富集工艺较为不成熟且不同原料中的鲨肝醇含量参差不齐，在售的鲨肝醇产品为富含鲨肝醇的鲨鱼肝油，大多为化学合成，而化学合成的鲨肝醇存在生物活性功效低下等问题[2]。

    目前，国内外鲨肝醇分离、纯化的方法主要有超临界流体法、分子蒸馏法、酯交换法、柱色谱法、薄层色谱法(TLC)等[5-6]。V ázquez 等[7]采用超临界流体萃取技术分离、纯化鲨鱼肝油中的鲨肝醇，得到高纯度的鲨肝醇。然而，超临界流体萃取法设备投入高，操作相对复杂。郭正霞[2]利用氧化铝柱层析技术分离、纯化鲨肝醇，使鲨鱼肝油不皂化物中鲨肝醇含量明显提高，其未考察洗脱液、洗脱流速等因素对柱层析效果的影响。本研究以鲨鱼肝油中不皂化物为原料，采用中性氧化铝柱层析分离、纯化鲨肝醇的工艺，通过气相色谱法(GC)与薄层层析法(TLC)分析制备样品中角鲨烯等活性物质，以期为鲨肝醇富集工艺及鲨鱼肝油的高值化利用提供技术支持。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    粗制鲨鱼肝油，海力生集团有限公司；鲨肝醇标品(纯度≥98%)、硅烷化试剂(VBSTFA∶VTMCS=99∶1)、100～200 目中性氧化铝，国药集团化学试剂有限公司；角鲨烯标品(纯度≥99%)，美国Sigma公司；氢氧化钾、乙醇(95%)、盐酸、二氯甲烷、正己烷、无水甲醇、乙醚、乙酸等均为分析纯级，国药集团化学试剂有限公司。

    1.2 仪器与设备

    7890B 气相色谱仪，美国Agilent 公司；电子天平AL204 型，梅特勒-托利多有限公司；层析柱(Φ3.0 cm×60 cm)、硅胶板(Φ 5.0 cm×10.0 cm)，国药集团化学试剂有限公司；旋转蒸发仪RE-3000 ......