王令臣，洪诚毅，黄志勇

    (集美大学食品与生物工程学院 福建厦门361021)

    胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲衍生物[1]。胆固醇作为人体一种重要的脂质，是构成细胞膜的重要部分，可维持细胞膜的稳定并调节细胞膜的流动性[2]。人体自身可以合成胆固醇，也可从食物中摄取胆固醇，然而过度摄入胆固醇会引起诸如心肌缺血、冠状动脉粥样硬化和冠心病等疾病[3]。人体每日胆固醇的摄入量不应该超过200 mg/dL[4]。目前胆固醇的检测方法主要有：高效液相色谱法(HPLC)[5]、电化学法[6]和比色法[7-8]。HPLC 法需要大型的仪器、设备，而且依赖专业技术人员操作。比色法通常采用3，3'，5，5'-四甲基联苯胺(TMB)进行显色，然而其在空气中易被氧化且难溶于水，导致检测限高、稳定性差。研究一种简便、快速、准确性强的胆固醇检测方法很有必要。

    氯化血红素作为过氧化物模拟酶，相较于辣根过氧化物酶(HRP)获取成本低、易储存、不易变性，应用广泛[9]。酪胺是过氧化物酶的理想供氢荧光底物[10-11]，在波长426 nm 处有最大荧光峰，由于其反应快速、灵敏，因此常被用于过氧化氢等物质的检测[12]。本试验采用酪胺作为供氢底物检测荧光强度，可以降低检测限，提高检测灵敏度，检测原理如图1所示。胆固醇被胆固醇氧化酶氧化产生过氧化氢，过氧化氢在氯化血红素催化下氧化酪胺产生荧光。通过测定反应体系在波长426 nm处的荧光强度，可测定样品中的胆固醇含量。

    图1 试验原理示意图Fig.1 Schematic illustration of the detection method principle

    1 试验部分

    1.1 仪器与试剂

    牛奶、低脂牛奶、脱脂牛奶和酸奶购于当地超市；胆固醇(≥99%)、胆固醇酶(Cholesterol oxidase ......