刘晓静，梁幸豪，朱 静，楚 敏，顾美英，唐琦勇，张志东*

    杏仁是蔷薇科落叶乔木植物杏的种仁，是我国传统的药食兼用资源。其富含多种营养成分，其中油酸、亚油酸含量占脂肪酸总量的90%以上。杏仁具有多种益生功能，可抗炎症、抗肿瘤、提高免疫力、调节血脂、预防心血管疾病。同时，还具有美容护肤、促进毛发生长、改善发质、减肥等作用[1-3]。此外，维吾尔族传统的饮食习惯表明，当食用过多杏果引起腹泻时，适量食用杏仁能够有效缓解腹泻，然而其内在的机制尚不清楚。

    植物内生菌广泛存在于各种植物的根、茎、叶、果实、种子等组织中，因受宿主植物的保护，而具有相对稳定的生存空间，并与宿主在长期进化过程中形成互利共生的关系[4]。研究表明，植物的相对优势内生细菌菌群主要包括：假单胞属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacterium)、土壤杆菌属(Agrobacterium)4个属[5]。对花生[6-7]、银杏[8]、核桃[9-10]等众多果仁内生细菌的研究表明，其中蕴藏着大量宝贵的天然产物产生菌。部分菌株具有广谱的抗菌活性，促进果仁生长，提高宿主植物中SOD、CAT 等酶活力等功能。目前，有关杏仁内生菌的研究鲜有报道。解析小白杏仁内生细菌群落组成，筛选相关的功能菌株，为进一步分析杏仁多种益生功能提供科学依据。

    本研究采用传统分离培养法结合Biolog-ECO微平板法，对库车小白杏仁内生细菌群落碳源主要利用类型进行分析，并对其内生细菌进行分离和鉴定，同时对相关菌株的产蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、果胶酶及抑菌特性进行验证，为进一步探究库车小白杏仁内生细菌群落多样性，解析活性酶产生菌与杏仁生理机能和潜在功能间的关系提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    库车小白杏于2018年6月采自库车县乌恰镇(E82.8188°，N41.6781°)小白杏果园中。采用随机采样法，选择果实自然成熟、无机械伤痕、无病变，且表皮有光泽，颜色、大小、硬度等表观一致的小白杏，经发泡网包裹装筐后，12 h 内运回实验室，于4 ℃下贮藏，并在48 h 内开展相关表面消毒、去核、取仁，以及内生菌的分离筛选等工作。

    供试菌种：黑曲霉、青霉、链格孢霉、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均由新疆农业科学院微生物应用研究所菌种保藏室提供。

    1.2 培养基

    1.2.1 分离培养基 TSA 培养基、高氏1 号培养基、R2A 培养基、完全培养基、营养琼脂(NA)培养基、LB 培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、察式培养基、牛肉膏蛋白胨液培养基等 ......