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编号:39502
DPA体外抗炎活性及机制研究
http://www.100md.com 2021年8月11日 2021年第7期
分泌量,磷酸化,1材料与方法,2试剂,3仪器与设备,4方法,5数据统计分析,2结果与分析,1DPA对NO分泌和iNOS表达的影响,2DPA对PGE2分泌和COX-2表达的影响,3DPA对炎症因子分泌量的影响,4DPA对炎症因子mR
     郑振霄,朱 凯,戴志远*

    (1浙江工商大学海洋食品研究院 杭州 310012 2浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室 杭州 310012)3 浙江工商大学 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心 杭州 310012)

    炎症是活体组织对有害刺激的一种保护性生理反应,通常情况下,炎症反应是为了清除有害刺激并促进伤口愈合。然而,持续的炎症反应会损伤机体[1-3]。由于快节奏的生活方式,导致出现更多不健康的饮食方式和不规律的作息时间,使人们体内发生炎症的概率大幅增加。如果炎症得不到有效控制,很容易引发癌症、心血管疾病和代谢疾病等恶性疾病,严重影响人们的生活质量[4-7]。目前,市面上用于消炎的多数为西药制剂,这些制剂虽具有一定的消炎作用,但副作用、耐药性等问题不容忽视。

    近年来,随着人们对n-3 多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)研究的不断深入,发现n-3PUFA【主要指二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)、二十二碳六烯酸(DHA)】之所以对人体产生有益作用,与它们具有的抗炎作用是分不开的。此外,n-3PUFA 是天然存在于自然界中的物质,长期服用几乎不会对人体产生毒副作用,因此,对n-3PUFA 抗炎活性及机制的研究成为热点[8]。目前,相关研究主要集中在EPA 和DHA 上,对DPA 相关活性及机制的研究非常少。这主要是因为DPA 与EPA 和DHA 的结构性质相似,难以获得DPA 纯品。二十二碳五烯酸(DPA)是α-亚麻酸(ALA)经过碳链加长酶、去饱和酶和β-氧化代谢而成,存在于金枪鱼、三文鱼等深海鱼类及海豹、海狗等海洋哺乳动物中,含量一般在2%~7%,此外在动物瘦肉、牛乳中也有少量分布[9]。

    本文以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7 为炎症的体外模型,采用本实验室自制的DPA 纯品对其进行干预,通过炎症介质和炎症因子评价DPA的抗炎能力,并从NF-κB 代谢通路的角度探索DPA 体外抗炎活性机制,旨在为DPA 后续的研究提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    DPA 乙酯(纯度>97%)由本实验室自制,制备方法参考文献[10];RAW264.7 细胞,中科院上海生命科学研究院(110642);DMEM 高糖培养基,海克隆生物化学制品(北京)有限公司;胎牛血清,浙江天杭生物科技股份有限公司;PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6 和IL-10 试剂盒,美国R&D 公司。

    1.2 试剂

    LPS(分析纯) ......

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