李墨钊，热米拉·阿扎提，郑晓冬，周文文*

    (1浙江大学生物系统工程与食品科学学院 杭州 310058 2华中农业大学生命科学技术学院 武汉 430070)

    新疆奶疙瘩是一类历史悠久的结晶状发酵酸奶，风味独特，营养价值丰富，可加速人体代谢，提升人体抵抗力及提供维生素和矿物质，成为深受哈萨克族和维吾尔族等少数民族喜爱的传统食品。乳酸菌作为食品发酵中的重要微生物，是乳制品生产过程中的优势菌种。作者对新疆奶疙瘩开展研究，从中分离出多种乳酸菌，通过特定生化指标的测定筛选出有益生特性的优质乳酸菌资源[1]。课题组阿扎提等[2]对奶疙瘩中相关菌株进行分离纯化，筛选获得鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)R4 和瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)S4 等代表性菌株。秀丽隐杆线虫具有生命周期短，易于培养和与哺乳动物的高相似性等特征，可作为益生菌动物模型建立的良好材料，一直被认为是人体衰老领域研究的首选模式生物[3]。

    本试验选用奶疙瘩样品，对其含有的益生菌进行高通量测序，研究其菌群多样性，确定优势菌群。前期对不同益生菌种的耐酸耐胆盐、疏水性、抑菌性及抗氧化等生化特性进行测定，从中分离筛选得到具有良好益生特性的菌株鼠李糖乳杆菌R4。本文以秀丽隐杆线虫为研究模型，研究R4 对其正常生理、生化指标(线虫寿命、产卵量、运动能力、热应激和氧化应激抵抗能力)的影响，探究R4的抗衰老作用，通过转录组测序分析其延寿机制，为进一步开发高效微生态制剂奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 试验材料

    1.1.1 原料与试剂 奶疙瘩样品来自新疆维吾尔族自治区5 个地区(乌鲁木齐市、伊犁市、塔城市、阿泰勒地区和石河子南山地区) 的牧民家庭(图1)，制作工艺采取家庭式传统方法发酵，输送途中用冰袋保藏，在实验室中4 ℃保存。

    图1 来源于新疆不同区域的5 个奶疙瘩样品Fig.1 Five samples of milk knots from different regions in Xinjiang

    琼脂糖、蛋白酶K、MgCl2、Platinum-DNApolymerase、dNTP-mix、PCR Buffer I、Chelex 裂解液、脱脂乳、M9 缓冲溶液、线虫冻存缓冲液、S medium、同期化漂白液、NGM 培养基、LB 培养基 ......