邹坚桥，高观祯，杨多佳，汪惠勤，柯李晶*，彭彰文，周建武，饶平凡，金义光，余兆硕，罗思浩

    (1 中国科学院上海生命科学研究院-浙江工商大学食品营养科学联合研究中心 杭州310035 2 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所 北京100850)

    毛细管电泳是以毛细管为分离场所，在高压电场的驱动力下，带电粒子依据淌度和分配系数不同而实现快速分离的电泳技术，具有高效、简便、检出限低、灵敏度高等优势。近年来，毛细管电泳广泛应用于基质复杂的食品检测分析，例如Li等[1]采用毛细管区带电泳检测食品中的纳他霉素含量；田春秋等[2]利用毛细管电泳检测牛奶中的青霉素中间体以及3 种青霉素类药物；刘鸣畅等[3]将毛细管电泳用于检测掺假燕窝中银耳成分。基于不同细胞和不同生理活性条件下细胞表面带电性的差异，毛细管电泳是细胞分离分析的有效手段。例如Lu 等[4]利用毛细管电泳鉴别不同动物的红细胞；温桂兰等[5]采用毛细管电泳研究酿酒酵母凋亡细胞。

    巨噬细胞是机体内重要的免疫细胞，具有识别、吞噬和清除凋亡细胞及非功能性的胞外成分等功能，其在不同环境和生理条件下有着明显的形态和功能差异[7-9]，常作为评估食品组分对人体作用的试验细胞模型。程安玮等[10]发现甘草多糖能激活巨噬细胞，提高其吞噬能力和能量代谢水平，同时可分泌多种具有杀瘤作用的活性因子；Wang 等[11]研究发现猪骨汤中纳米胶粒与巨噬细胞作用后，被迅速内化，防止活性氧自由基引起的线粒体功能障碍和吞噬抑制；杜华英等[12]认为河蚬糖蛋白通过影响巨噬细胞吞噬能力来发挥免疫活性。李杰萍等[6]利用毛细管电泳定量分析巨噬细胞中5-脂氧合酶信使核糖核酸表达。然而，目前尚未见用毛细管电泳分离巨噬细胞的研究。

    河蚬汤具有良好的保肝护肝功效，在煮汤过程中产生大量的自组装活性纳米胶粒[13-15]，纳米胶粒被摄食进入消化道后，首先与包括巨噬细胞在内的黏膜细胞发生相互作用，其效应不明。作者先期研究已建立河蚬汤纳米胶粒的毛细管区带电泳分离分析方法[16]。本文以河蚬汤为例，尝试利用毛细管区带电泳，观测河蚬汤与巨噬细胞作用后汤的多尺度组分与纳米胶粒的变化，以及巨噬细胞相应的表观形貌、表面电荷和功能的变化，以期建立一种简便、快速的研究食品成分-人体相互作用的新方法。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    将河蚬(台湾花莲立川渔场馈赠)与水按物料比1∶1 煮沸60 min，冷却后纱布过滤，滤过液即为粗制的河蚬汤。

    胎牛血清(FBS)，购于以色列Biological Industries 公司；0.25%胰酶消化液、青霉素-链霉素混合溶液、DMEM 培养基、D-Hank's 细胞平衡液等细胞培养试剂 ......